嫁接介导的RNAi调节菊花DNA甲基转移酶基因表达及遗传分析

Several studies in the last few years indicate that epigenetic information which is an important part of genetic information plays an essential role in the formation of biological traits. DNA methylation is the most important of epigenetic information, So we can get epigenetic variation by changing the plant 's DNA methylation Status. So far, research about creation of new ornamental plant materials by changing epigenetic information is very few. In this research, we will clone Methyltransferase gene of chrysanthemum and Artemisia annua with Homology cloning and Genome walking strategy and design the RNAi vectors by comparison of the different fragments of them.Then we will interfere with the expression of the DNA methyltransferase by RNAi and grafting method and judge the possibility of the formation of a new type of variation, because of changing epigenetic information and analyse the law and the stability of the variation. This work will lay the technical and theoretical foundation for the improvement and breeding of ornamental by epigenetic means.

近年来的研究表明，表观遗传信息是生物遗传信息的重要组成部分，对于生物性状的形成具有重要作用。而DNA甲基化是最主要的表观遗传形式，改变植物的DNA甲基化可以导致可遗传的变异。目前关于改变观赏植物表观遗传信息，进而创造新的变异的研究较为缺乏。本研究拟采用同源序列法和新的染色体步移策略，克隆到菊花和青蒿DNA甲基转移酶基因，以两者的差异片段序列为基础设计该基因的RNAi载体，然后通过RNAi技术和嫁接手段，干涉菊花DNA甲基化转移酶的表达，判断改变观赏植物表观遗传信息可否形成新的变异类型，并对变异的规律及稳定性进行分析，为通过表观遗传学手段进行观赏植物改良与育种打下技术与理论基础。

近年来的研究表明，表观遗传信息是生物遗传信息的重要组成部分，对于生物性状的形成具有重要作用。而DNA甲基化是最主要的表观遗传形式，改变植物的DNA甲基化可以导致可遗传的变异。目前关于改变观赏植物表观遗传信息，进而创造新的变异的研究较为缺乏。 本研究采用同源序列法和新的染色体步移策略，克隆和鉴定了菊花和青蒿DNA甲基转移酶基因MET1的全长cDNA序列，以两者的差异片段序列为基础设计了该基因的RNAi载体，然后通过RNAi技术和嫁接手段，干涉菊花DNA甲基化转移酶MET1基因的表达，发现转基因材料及其嫁接材料均表现为矮化，花期提前，遗传分析表明，转基因材料及其嫁接材料DNA甲基化相关基因的表达均发生了不同方向的改变，该研究为通过表观遗传学手段进行观赏植物改良与育种打下技术与理论基础。