microRNA-200c在胃癌SGC7901细胞顺铂耐药中作用机制及调控网络研究

耐药是影响胃癌化疗效果的关键问题。本课题组前期研究利用microRNA芯片技术分析胃癌顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP及其敏感株中microRNA表达谱，发现microRNA-200c的表达存在显著差异。初步研究证实microRNA-200c过表达可逆转胃癌细胞的耐药表型，而且上调microRNA-200c逆转耐药功能与抑癌基因PTEN及其下游通路相关。本项目拟以microRNA-200c过表达和抑制表达细胞为模型，通过报告基因和实时荧光定量PCR、western blot等技术研究microRNA-200c在胃癌耐药中的作用及其分子机制，揭示和验证microRNA-200c新的耐药相关靶点RhoE，并探讨microRNA-200c对RhoE和E-cadherin的调节及可能的下游通路和相互调控网络，为逆转胃癌耐药提供潜在的治疗靶点。

本研究采用Real-time RT-PCR、双荧光素酶报告基因系统、Western Blot、MTT等技术手段和microRNA-200c 过表达细胞为模型，首次发现：(1) microRNA-200c的过表达能显著增加SGC7901/DDP细胞在体外对顺铂、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇四种抗肿瘤药物的敏感性，发挥化疗增敏作用；能显著抑制SGC7901/DDP细胞的体外增殖能力。(2)应用双荧光素酶报告基因系统，证实了RhoE是microRNA-200c 的潜在靶点。(3)microRNA-200c对SGC7901/DDP细胞耐药逆转和增殖抑制的作用与诱导E-cadherin、PTEN及BAX蛋白的表达、抑制Akt通路的激活和下调Bcl-2蛋白的表达有关。上述结果揭示了microRNA-200c 在胃癌耐药中的作用及其分子机制，验证了microRNA-200c 新的耐药相关靶点RhoE。