本研究应用CDNA未端快速扩增方法克隆了U1RNP 70KD抗原全长CDNA序列,建立了非同位素银染测序技术对PCR扩增产物直接进行序列分析,并进一步将cDNA克隆与原核表达载体相联结,导入大肠杆菌内表达验证表达产物是否具有抗原性。在U1RNP70KD抗原长cDNA定序的基础上,应用电脑软件推断分析70KD抗原的一级结构及表位区域。结果表明U1RNP 70KD抗原全长cDNA为1.7kb左右,开放阅读框为第172-1485Bp编码氨基酸总数为437个,分子量为51.56KD。在原核中利用全长cDNA表达的蛋白质,显示正确的抗原性。抗原表位区域分析表明最高等水性区域为第231-244氨基酸。本项研究为制备U1RNP 70KD重组抗原,对抗原表性更精确定位,从分子免疫角度揭示自身抗体产生机理奠定基础。
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数据更新时间:2023-05-31
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