铜来源和水平对不同种属动物体内铜转运机制影响的研究

As ligandin of mang enzymes,copper participate energy metabolism,neurotransmitters synthesis,free radical cleaning ,etc.However, there is great difference of copper tolerated amount among different species of animals, the mechanism is unclear.Exploring the mechanism of this is may provide evidence for clarifying the mechanism of copper promoting growth and lay a foundation for developing new type feed additives.The project will product to study the effect of different resources and levels copper on copper concentration in liver cell, subcellular structure and enzyme activity.This is mainly realized by adding 0、7.8，15.6，31.2μmol/L copper sulfate and yeast copper of liver cells in vitro.The aim of product is to study the effect of different resources and levels copper on CTR1、CTR2、ATP7A、ATP7B mRNA expression by applying fluorescent Quantitative PCR Technique.Meanwhile,in order to clarify further mechanism of copper,we will use pigs and sheep,which was fed the diet that added different resources and levels copper,to research the effect of copper on copper concentration , subcellular structure injury and transport factors. The aim of the project is to clarify the mechanism of Copper tolerated amount among different species of animals and a basis for further illustrate Species differences of growth promoting of copper in chemical forms and level of dietary copper and copper transport at biochemical,cell and molecular cell.

铜作为许多酶的配基，参与能量代谢、神经递质合成、自由基清除等过程。但不同种属动物对铜的耐受量差异很大，具体机制不清楚。探索耐受差异机制为阐明高铜对不同种属动物促生长机理提供依据，也为开发新型饲料添加剂奠定基础。本项目旨在通过向体外培养的肝细胞中添加0、7.8，15.6，31.2μmol/L的硫酸铜和酵母铜，在添加24h后收集肝细胞和培养液，比较研究添加了不同来源和水平的铜对肝细胞中铜浓度及亚细胞结构和酶活的影响；应用荧光定量PCR技术，研究不同水平和来源的铜对肝脏铜转运因子CTR1、CTR2、ATP7A、ATP7B mRNA 表达的差异。同时，在饲料中添加不同来源和浓度的铜，饲喂羔羊和仔猪，比较研究其对肝铜浓度、亚细胞损伤程度及转运因子的影响。在生化、细胞和分子水平上阐明不同种属动物对铜耐受不同的机制差异，为深入阐明铜促生长作用的种属差异奠定基础。

铜作为许多酶的配基，参与能量代谢、神经递质合成、自由基清除等过程。但不同种属动物对铜的耐受量差异很大，具体机制不清楚。探索耐受差异机制为阐明高铜对铜作为许多酶的配基，参与能量代谢、神经递质合成、自由基清除等过程。但不同种属动物对铜的耐受量差异很大，具体机制不清楚。探索耐受差异机制为阐明高铜对不同种属动物促生长机理提供依据。本项目在体外培养的肝细胞中添加不同浓度的硫酸铜和氨基酸铜对CTR1的表达呈现先升高后降低的趋势，而ATP7B的表达呈现一直升高的趋势，但不同铜源间差异不显著；同时，在饲料中添加不同来源和浓度的铜，饲喂羔羊和仔猪，发现随着铜浓度的提高均可提高仔猪和羔羊的肝铜浓度、且对肝脏有轻微损伤；生长猪日粮铜添加水平为150 mg/kg 日粮促进铜转运因子 Ctr1、ATP7B mRNA的表达；铜添加水平为 300 mg/kg 日粮抑制铜转运因子CTR1 、ATP7B mRNA 的表达；绵羊日粮中添加 Cu 10 mg/kg，绵羊肝脏铜转运相关因子 CTR1、ATP7A 和 ATP7B 表达量均升高；日粮中添加 Cu 25mg/kg， CTR1、ATP7A 表达量降低，而ATP7B 表达量升高。综上所述，生长猪和绵羊对铜的耐受差异主要可能是由于添加铜后对铜转入因子和转出因子的影响差异造成的，且对不同形式的铜的吸收差异所导致的。探究铜在绵羊和猪体内铜转运的过程，为进一步揭示铜在不同种属动物体内的不同转运过程提供理论依据，也为进一步完善高浓度铜促生长机制的理论，为铜在畜牧生产中的合理而安全的应用奠定基础。