从胆碱能抗炎通路探讨"合治内府"的效应机制与理论意义

本项目拟从两个方面分别探讨"合治内府"理论的效应机制与理论意义。第一部分以较为经典的大肠腑病溃疡性结肠炎（UC）、小肠腑病变十二指肠溃疡（DU）为研究对象，利用形态学、免疫组织化学、分子生物学等方法，通过对比研究电针曲池与上巨虚、小海与下巨虚等上、下合穴治疗UC、DU的效应，部分阐明上、下合穴与相应内腑之间的关系，初步揭示"合治内府"理论的科学内涵；第二部分以与消化系统生理病理相关的内腑（胃、小肠、大肠、胆）的对应病变（胃应激性溃疡、DU、UC、胆总管结石症）为研究对象，从胆碱能抗炎通路，对比研究电针足三里、上巨虚、下巨虚、阳陵泉等下合穴对以上疾病炎症反应的干预机制，探讨六腑下合穴治疗相应腑病是否存在相对特异性、以及是否存在交叉干预效应等，期以达到部分证实"合治内府"之合的内涵以及下合穴治疗相应内腑病变存在相对特异性的目的，为对中医经典理论进行原创性研究开辟新的思路与方法。

《灵枢•邪气脏腑病形》记载：“荥输治外经，合治内府”，即认为合穴主治相应内腑病变。而针灸特定穴中，合穴有五输穴之合穴与下合穴的不同，针灸界认为“手三阳无腑证”，而下合穴对相应內腑病变的疗效得到了临床普遍肯定，“合治内府”之“合”的确切含义及下合穴治疗相应内腑病变的特异性值得进一步探究。针对上述问题，本项目在既往研究的基础上，分两阶段实验：一是通过分别电针UC模型大鼠曲池、上巨虚和DU模型大鼠小海、下巨虚，采用形态学、分子生物学、免疫组化技术，对比观察电针上、下合穴对大鼠组织形态学及胆碱能抗炎通路相关因子的影响,研究“合治内府”之“合”的内涵；二是通过电针与消化生理病理相关的内腑下合穴足三里、上巨虚、下巨虚、阳陵泉分别对于相应内腑（胃、大肠、小肠、胆）病变（急性胃黏膜损伤、UC、DU及急性胆囊炎）的影响，利用前述现代技术检测大鼠或豚鼠组织形态及胆碱能抗炎通路相关因子的变化，探讨下合穴治疗对应内腑是否存在相对特异性。研究发现：①电针曲池、上巨虚能降低UC模型大鼠结肠溃疡评分，而小海、下巨虚能降低DU 肉眼评分，且均能降低血清TNF-α含量及NF-κB、HMGB1在组织中的表达，升高血清ChAT与组织α7 nAChＲ 的表达，且电针上巨虚对UC的疗效优于曲池，下巨虚治疗DU的效应优于小海。②总体而言，电针足三里、上巨虚、下巨虚、阳陵泉）均可不同程度改善对应内腑疾病模型动物损伤组织形态及炎症，降低相应大鼠血清、组织IL-1β、TNF-α、HMGB1含量，减少组织NF-κB表达并增加α7 nAchR表达，且足三里对AGML模型大鼠的总疗效优于上巨虚、下巨虚、阳陵泉及承筋穴，上巨虚对UC模型大鼠的疗效优于下巨虚、阳陵泉、足三里及承筋穴，下巨虚对DU模型大鼠的疗效优于上巨虚、阳陵泉及承筋穴，与足三里疗效相当，阳陵泉对AC模型豚鼠的干预效应优于足三里、上巨虚、下巨虚穴。本项目从形态、蛋白及基因水平，初步阐明了“合治内府”之“合”指下合穴，下合穴治疗所属内腑病变存在相对特异性，“合治内府”理论的临床意义在于下合穴主治相应内腑病变。本项目已在国内学术期刊发表论文7篇，其中Medline收录2篇；已录用待见刊国内外期刊论文9篇，其中Medline收录期刊录用2篇，投稿在审期刊论文6篇，发明专利3项，培养硕士研究生8名，培养博士研究生2名，2014年获湖南省第七届研究生创新论坛三等奖。