从CD4+T辅助细胞的分化探讨由α7nAChR介导的胆碱能抗炎通路抑制RA炎症反应的机制

Th细胞各功能性亚群（Th1,Th2,Th17）比例及分化异常与类风湿关节炎（RA）病变密切相关。我们既往研究已从炎症角度阐述了由α7nAChR介导的胆碱能抗炎通路(CAP)对RA的保护作用及机制；而CAP能否通过影响Th亚群分布及分化来抑制RA炎症尚未见报道。申请者发现烟碱可抑制胶原性关节炎(CIA)小鼠Th1亚群优势反应,减低滑膜IL-17表达。且T细胞表面也存在α7nAChR。在此基础上，以CIA小鼠为模型，观察腹腔注射烟碱及切断迷走神经对Th亚群分布及相关细胞因子的影响；并分离脾脏CD4T细胞观察激活及阻断CAP对Th分化的影响。从RA患者外周血分离CD4T细胞，采用极化培养方法，应用胆碱能激动剂及α7nAChR阻断剂，深入探讨CAP及其受体在Th细胞分化中的作用及机制。开展本项目研究可望从全新角度揭示CAP对RA炎症抑制作用的机制，从而为发展基于CAP信号的免疫治疗提供理论依据。

Th细胞各功能性亚群（Th1, Th2, Th17）比例及分化异常与类风湿关节炎（RA）病变密切相关。我们既往研究已从炎症角度阐述了乙酰胆碱受体(α7nAchR)介导的胆碱能抗炎通路(CAP)对RA的保护作用及机制；而CAP能否通过影响Th亚群的分布及分化来抑制RA炎症尚未见报道。本课题在前期研究基础上，以胶原诱导性关节炎（CIA）小鼠为模型，观察胆碱能激动剂及迷走神经切断术对Th亚群分布及分化的影响；分离RA患者外周血CD4+T细胞观察激活及阻断CAP对Th细胞分化及成熟的影响，深入探讨CAP及其受体在Th细胞分布及分化中的作用及机制。实验结果表明烟碱减轻CIA小鼠关节炎症；烟碱减少CIA小鼠外周血、脾脏及关节滑膜Th17细胞分布；增加外周血及脾脏中Th2细胞分布，但对外周血及脾脏中Th1细胞分布无影响。烟碱及GTS-21通过作用于α7nAch受体抑制RA患者CD4+T细胞向Th17细胞分化。GTS-21通过作用于α7nAch受体抑制RA患者CD4+T细胞向Th1细胞分化，烟碱对Th1细胞分化无影响。烟碱和GTS-21通过作用于α7nAch受体促进RA患者CD4+T细胞向Th2细胞分化。本研究为发展基于CAP信号的RA免疫治疗提供了新的理论依据。