鼠疫耶尔森菌LcrV抗原中和表位筛选鉴定及其关键氨基酸残基的研究

鼠疫是由鼠疫耶尔森菌所致的烈性传染病，LcrV抗原是鼠疫耶尔森菌合成并分泌的重要毒力因子和主要保护性抗原，在鼠疫菌的感染与免疫中发挥重要作用。本研究以鼠疫耶尔森菌LcrV抗原为研究对象，采用中和性单克隆抗体筛选噬菌体展示肽库方法，结合氨基酸点突变、缺失突变及生物信息学方法，确定LcrV抗原的中和表位及其关键氨基酸残基；并对中和表位与LcrV抗原多种功能的分子机制之间的关系，及中和表位在疫苗免疫和鼠疫感染过程中的意义进行研究。通过本项目研究，一方面将增进对LcrV抗原免疫机理的认识，为鼠疫亚单位疫苗和鼠疫表位疫苗等新型疫苗研制提供理论依据和评价标准，另一方面也将加深对鼠疫耶尔森菌感染和三型分泌系统作用的分子机制的了解，为设计有针对性的鼠疫防治药物提供靶标和手段。

鼠疫耶尔森菌保护性抗原在细菌的感染与免疫中发挥重要作用。本项目对保护性抗原中和性表位进行了研究，在鼠疫防治药物上有了新的发现，对病原菌与宿主相互作用机理方面提出了新的假设。获得了鼠疫保护性抗原的中和性和非中和性单克隆抗体；制备了抗原突变体，研究了其免疫原性和免疫保护性；钓取了中和性单抗可变区基因，制备了具有保护性的单链抗体；筛选到了保护性抗原的中和性表位，初步验证了其免疫原性，分析了其与抗原作用机制的关系。本项目丰富和发展了对鼠疫保护性抗原的认识，积累的实验材料为今后继续开展鼠疫相关研究打下良好基础。