抑制P-gp在中枢外排HIV-蛋白酶抑制剂的黄酮类化合物筛选及其机制研究

蛋白酶抑制剂是治疗HIV-1感染的一线药物。血脑屏障上以P-糖蛋白(P-gp)为代表的药物转运体的外排作用导致其进入脑内的浓度过低，为病毒突变和增殖提供了理想的环境，常导致该类药物不能彻底地清除病毒，最终使治疗失败。本课题组通过前期工作并结合文献发现黄酮类化合物能逆转P-gp在中枢的外排作用，同时具有来源广泛、无毒、能协同抗病毒及增强机体免疫力等优点，有望作为蛋白酶抑制剂治疗HIV-1感染的增敏剂。本研究拟在前期工作的基础上，应用细胞生物学、分子生物学、计算机模拟等技术，在细胞及在体动物模型进一步筛选具有P-gp逆转作用的黄酮类化合物，明确其构效关系，确定黄酮类化合物对蛋白酶抑制剂的药代动力学（尤其是向中枢转运）的影响，围绕孕烷X受体（PXR）信号通路阐明黄酮类化合物对抗P-gp外排作用的的分子机制，为开发高效低毒的P-gp逆转剂（蛋白酶抑制剂增敏剂）提供有价值的理论和实验依据。

蛋白酶抑制剂是治疗HIV-1感染的一线药物。血脑屏障上以P-糖蛋白(P-gp)为代表的药物转运体的外排作用导致其进入脑内的浓度过低，为病毒突变和增殖提供了理想的环境，常导致该类药物不能彻底地清除病毒，最终使治疗失败。本课题组通过前期工作并结合文献发现黄酮类化合物能逆转P-gp在中枢的外排作用，同时具有来源广泛、无毒、能协同抗病毒及增强机体免疫力等优点，有望作为蛋白酶抑制剂治疗HIV-1感染的增敏剂。本研究拟在前期工作的基础上，应用细胞生物学、分子生物学、计算机模拟等技术，研究了①黄酮类化合物对P-gp向MDCKII细胞 和HBMEC细胞内转运HIV-1蛋白酶抑制剂的影响，②黄酮类化合物作为P –gp抑制剂的构效关系研究，③黄酮类化合物对普通小鼠和和大鼠药代动力学（尤其是脑内分布）的影响，④围绕孕烷X受体（PXR）信号通路阐明黄酮类化合物对抗P-gp外排作用的的分子机制：包括黄酮类化合物对PXR激活（PXR向细胞核转移）的影响，对PXR-RXR杂二聚体形成的影响，对P-gp基因转录和蛋白表达的影响，对P-gp活性 的影响。