转导CalpastatincDNA重组质粒对肌肉发育与肉嫩化影响

本项目从构建Calpastatin的原核表达载体入手,获得了具抑制活性的Calpastain功能片段,并制备了Calpastatin抗体,为钙蛋白酶系统的定位及生理功能研究提供了非常有用的蛋白探针及专一性的抑制剂.以肌纤维的小片化指数为指标,结合Western免疫印迹技术,发现Calpastatin的含量与肉的嫩化程度密切相关.融合实验表明,钙蛋白酶的内、外源抑制剂如Calpastatin、EGTA等可以抑制肌细胞的融合，为钙蛋白酶系统参与细胞的融合过程提供了证据。在此基础上，进一步构建了Calpastain的正、反义真核表达载体，并成功地转化了肌细胞，实现了细胞内Calpastatin含量的人为调节，为研究钙蛋白酶系统与肌肉发育的关系提供了直接的证据，为最终通过基因操作或其他手段获得高产瘦肉型的品种打下基础。