开通玄府法治疗老年性痴呆的作用机制研究

前期研究发现，玄府郁滞，气液不通，神机运转障碍是老年性痴呆（AD）的基本病机。据此立开通玄府，流通气液，运转神机法创制醒脑液（XNY）用于AD的治疗，效果满意。本项目拟从研究淀粉样前体蛋白(APP)基因、β-淀粉样蛋白（Aβ)降解酶NEP基因表达着手，探讨开通玄府法治疗AD 的深层分子机制。运用当前最为理想的AD 模型APP 转基因小鼠，以Ellman改良法测定小鼠脑内乙酰胆碱脂酶活性，以Westernblots法检测APP蛋白表达，以逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测APP基因、Aβ降解酶NEP基因的表达。并运用文献诠释研究方法，将1000部中医古文献进行多主题词检索，文献梳理，理论勾勒，从古文献源头上诠释玄府气液和神机运转理论。最后分析上述各变量之间的差异、相关性，评定疗效，探讨中药干预 AD 的分子机制及 AD 开通玄府、流通气液、运转神机治疗方法。

目的：本项目拟从研究淀粉样前体蛋白(APP)基因、β -淀粉样蛋白（Aβ )降解酶NEP 基因表达着手，探讨开通玄府法治疗AD 的深层分子机制。.方法：采用《中华医典》对古代相关文献进行多主题词检索、诠释；采用Morris水迷宫测定小鼠空间学习记忆能力，避暗箱测定其条件学习记忆能力。使用比色法检测小鼠脑中乙酰胆碱（Ach）、乙酰胆碱转移酶（ChAT）及乙酰胆碱酯酶（AchE）的活性。采用ELISA法测定淀粉样蛋白40、42（Aβ40、Aβ42）的表达。采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠大脑组织中NEP mRNA的表达。以Westernblots 法检测APP 蛋白表达。结果：与模型组比较，阳性对照组、用药高剂量组及用药中剂量组小鼠血浆中Ach含量均有所提高，而AchE含量则出现下降。阳性对照组、用药高剂量组及用药中剂量组小鼠大脑组织内Aβ40含量下降，XNY高剂量组脑内NEP mRNA含量表达上调、老年斑的表达下调。结论：玄府郁滞、气液不通、神机运转障碍是痴呆的关键发病机制，以开通玄府法组方的醒脑液可以干预淀粉样蛋白的代谢过程，减少脑内毒性蛋白的产生，其作用机制可能与调控胆碱能系统有关。从而减少脑内毒性蛋白的表达，改善阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力。.关键词：老年性痴呆；开通玄府；益气补肾；醒脑液