肿瘤转移抑制因子CD82细胞外小环结构域抑制肿瘤细胞迁移机制的研究

CD82 is considered as a wide-spectrum invasion- and metastasis-suppressor.The study on the mechanism of CD82 inhibiting cancer metastasis has been paid more and more attention.But the precise mechanisms are still unclear.The study on the molecullar structure foundation of CD82 will play an important role in the ilucidating the mechanism of CD82 inhibiting cancer metastasis and developing new anti-metastasis drugs.In our previous studies on the mechanism of CD82 inhibiting cancer metastasis, we found that CD82 small extracellular loop domain can markedly suppress the in vitro migration of cancer cells from different tissue ,including colorectal,breast and liver, 50μg/ml of CD82-LEL polypeptide can completely inhibit the cell migration. In this project, we shall further investigate the mechanism of CD82-SEL inhibiting cell migration, test the role of CD82-SEL anti-metastasis in vivo and or esterificate the CD82-SEL peptide at N-and C-terminal.The study of project will present the valuable date for developing anti-metastasis drugs from CD82-SEL peptide.

CD82被认为是广谱的肿瘤转移抑制因子。对其作用机制的研究日益受到重视。但其详细分子机理仍不清楚。其转移抑制作用分子结构基础的研究，对阐明CD82抑制肿瘤转移的分子机理，开发抗肿瘤转移新药，具有十分重要的理论意义和潜在应用前景。我们前期对CD82胞外结构域功能研究中，发现CD82胞外小环结构域多肽（CD82-SEL）对多种组织来源的肿瘤细胞，包括大肠癌细胞、乳腺癌细胞和肝癌细胞的运动迁移能力均有强烈的抑制作用，在50μg/ml 浓度时，细胞体外迁移完全被抑制。此属首次报导。其作用机理以及在体内对肿瘤转移抑制作用尚不清楚。该课题将对CD82-SEL多肽抑制癌细胞运动迁移的详细机理进行研究。观察CD82-SEL多肽在动物体内对肿瘤细胞转移的抑制作用。并通过对CD82-SEL多肽N-端、C-端脂酰化修饰，研究其对肿瘤细胞转移作用的影响。为将CD82-SEL开发抗肿瘤转移新药提供数据。

背景：.KAI 1/CD 82是研究最为详细的转移抑制因子之一. 在结构上，KAI 1/CD 82属于四跨膜蛋白家族的成员，包含四个跨膜结构域、两个细胞外环(小环EC1和大环EC2)、一个小胞质内环和胞内N-末端和C-末端. KAI 1/CD 82大部分结构域的功能已经弄清。然而，到目前为止，CD82胞外小环研究还很少，功能也不清楚。因此，我们的研究重点主要集中在CD82胞外小环结构上。.主要研究内容：.1.合成CD82胞外小环结构域氨基酸序列模拟肽（CD82EC1-mP），观察其对肿瘤细胞体外侵袭能力的影响。2.研究CD82EC1-mP作用的分子机制。并对CD82EC1-mP可能识别结合的靶分子进行了初步探讨。3. 研究CD82EC1-mP对肿瘤细胞在体内转移能力的影响。通过尾静脉注射建立了多种肿瘤细胞的纯系小鼠和裸鼠肺转移模型，研究CD82EC1-mP 对不同肿瘤细胞肺转移能力的影响。4. 对CD82EC1-mP抑制肿瘤细胞体外迁移及体内转移的结构基础进行了研究。.重点结果、关键数据：.1. CD82EC1-pM能促进肿瘤细胞同型粘附聚集，抑制肿瘤细胞对细胞外基质的粘附，抑制细胞迁移及贴壁生长2. CD82EC1-pM抑制粘附分子受体integrin介导的细胞信号通路，下调Wnt/β-Catenin信号转导通路、上调Hippo/Yap信号转导通路，从而抑制癌细胞EMT转化，降低其浸润及转移能力。3. CD82EC1-pM抑制多种癌细胞在纯系小鼠和裸鼠体内的肺转移。4. 电荷和构象是影响CD82EC1-pM作用的重要因素。CD82EC1-pM抑制癌细胞浸润转移作用依赖于空间构象的正确折叠。.科学意义：.在理论上，CD 82的EC1结构域的功能尚未被研究。一般认为EC1结构域不具有重要功能，或仅参与EC2域折叠。这一发现对CD 82抑制转移的机制的理解有了新的认识。在临床治疗上，以目前技术，包括基因治疗、诱导基因重新表达或直接应用完整的CD 82分子，都是不可行的。由于CD82EC1-MP本身就足以抑制肿瘤细胞的体外迁移和体内转移，并在细胞表面发挥其作用，因此EC1模拟肽可以直接用于临床，不需要复杂的基因转移或药物传递技术。CD 82在正常组织细胞中广泛表达，因此CD82CE1-mP是一种天然肽，不具有免疫原性，易于合成。CD82EC1-MP有望成为临床抗转移的候选