从基因修饰的人骨关节炎软骨细胞分解代谢研究补肾壮骨的软骨保护机制

骨关节炎（OA）关节软骨破坏的核心环节是软骨基质代谢的失衡，然而针对这一关键病理环节，尚无有效的治疗方法。补肾壮骨为OA治疗的基本治法，多年来应用于临床且疗效确切，但针对软骨基质代谢的影响及分子机制，缺乏深入研究。在前期动物实验证实补肾壮骨具有OA软骨保护作用的基础上，本研究以体外培养人OA软骨细胞为研究对象，借助生命科学基因修饰技术，采用阳离子脂质体介导IL-1β基因转染OA软骨细胞；研究补肾壮骨方药对基因修饰人OA软骨细胞增殖、凋亡及细胞外基质代谢的影响，对修饰后人OA软骨细胞金属基质蛋白酶表达及其上游IL-1/MAPK、NF-kB通路逐级信号分子mRNA 转录、蛋白磷酸化、信号转位的影响；从而阐释补肾壮骨法干预软骨基质代谢，发挥软骨保护作用的分子机制。该研究从一个侧面阐释"肾主骨"干预细胞遗传信息从而调控软骨细胞分解代谢的科学内涵，为药物干预软骨基质代谢的研究提供一条新思路和新方法。

骨关节炎（Osteoarthritis，OA）关键的病理改变是软骨破坏，软骨破坏的核心环节是软骨细胞分泌细胞外基质代谢的失衡，使分解代谢超过合成代谢。针对这一关键病理环节，目前尚无有效的治疗方法，中医药显示出较好的优势和前景。牛膝健步颗粒，为广安门医院院内制剂，结合名老中医多年经验，以补肾活血为主，并参考现代药理学成果，临床疗效明确。本研究以人体的OA软骨细胞进行体外培养作为研究对象，采用中药血清药理学方法，借助CCK-8法、流式细胞术、western blotting及ELISA技术。检测细胞增殖与凋亡、细胞上清液中IL-1β含量及细胞中IL-1β、MMPs蛋白表达情况，MAPKs信号转导因子表达情况，NF-κB信号通路表达状况。经本研究证实牛膝健步颗粒能够促进软骨细胞增殖、抑制细胞凋亡及细胞因子、干预细胞外基质代谢MMPs表达、调控细胞间信号通路MAPKS/NF-KB表达。从分子生物学角度阐述了中医中药在OA发病机制中的防治作用，通过干预骨关节软骨破坏合成及分解代谢，进而早期干预及防治OA的发生发展，为中医药早期防治OA软骨破坏的发生发展改善预后提供了实验依据，证实了中医“肾主骨”在OA早期防治中价值及意义，体现及充实了中医药“治未病”的思想。