孕激素对小鼠肠道树突状细胞功能的调节及其机制

树突状细胞（DC）是功能最强的抗原提呈细胞,在肠道免疫中发挥重要作用。肠道免疫功能和IBS的发生均存在性别差异，但具体机制不明。最近我们发现孕激素上调脂多糖（LPS）诱发的小鼠肠道DC表面CD40等标志性蛋白的表达，OVX小鼠（接受卵巢切除术并术后注射不同剂量孕激素）和正常雌性小鼠的肠道DC均表达孕激素受体（PR），根据预实验结果结合文献报道，我们推测孕激素通过和DC细胞PR结合激活JAK/STAT途径调节肠道DC功能。为验证该假设，我们利用PR(-/-)基因缺陷小鼠、OVX小鼠模型和动情周期不同阶段小鼠，使用分离原代DC的方法从正向和反向两个角度研究：1）孕激素对DC功能的影响，包括抗原提呈能力，刺激T细胞能力及吞噬功能；2）孕激素上调肠道DC功能的信号通路。该项研究将为解释消化道免疫功能差异的性别差异和女性克罗恩病、IBS发生高于男性的机理提供依据，为临床治疗提供新思路。

本课题研究了高糖对LPS诱导的肠道树突细胞及树突细胞DC2.4的凋亡的作用及其机制。.使用流式细胞术检测细胞的凋亡；使用Hoechst染色凋亡细胞核的形态改变；使用western和免疫组化检测凋亡相关蛋白的变化。结果发现：高糖处理24小时可以显著增加LPS诱导的细胞凋亡。通过wenstern我们发现生存蛋白AKT, ERK and Bcl-2表达减少，而凋亡蛋白Bax表达增多，通过免疫组化实验我们发现这些凋亡相关蛋白主要表达在胞浆。