Wnt信号通路在老龄缺血性心力衰竭中的作用及靶向干预研究

老龄是缺血性心力衰竭发病的高危因素，逆转心室重塑的病理生理过程是控制心衰发生的关键。我们前期研究发现MMP-9及III型胶原的过度表达和炎性细胞浸润增强是老龄缺血性心室重塑重的重要原因，且Wnt信号通路在老龄慢性心室重塑中过度激活，但具体机制不详。研究表明FrzA基因的过表达抑制Wnt通路的激活能减轻小鼠心室重塑、改善心功能。据此，本课题拟采用老龄缺血性心衰模型，探讨Wnt信号通路在老龄缺血性心衰中的作用及分子机制；同时，以Wnt信号通路为干预靶点，构建携带FrzA基因的重组AAV-9载体，靶向转导老龄小鼠心脏，通过检测Wnt通路相关蛋白、炎症因子及胶原蛋白表达、细胞凋亡、MMPs活性、血管密度、梗死面积、心功能等指标，阐明FrzA基因抑制Wnt信号通路防治老龄缺血性心力衰竭发生的分子机制，明确FrzA基因靶向干预治疗的有效性和可行性，为老龄缺血性心力衰竭的基因治疗提供新的思路和理论依据。

老龄是缺血性心力衰竭发病的高危因素，逆转心室重塑的病理生理过程是控制心衰发生的关键。研究发现Wnt信号通路在老龄慢性心室重塑中过度激活，进而导致心肌细胞肥大、成纤维细胞增生和心肌的纤维化，而抑制Wnt信号通路的激活对减轻心室重塑是有益的。本课题建立了老龄小鼠缺血性心力衰竭模型，证实Wnt信号通路参与老龄缺血性心力衰竭的病理生理过程，且在老龄心衰心肌组织中被高效激活。同时，构建携带eGFP报告基因及FrzA基因的重组AAV-9载体，体外研究证实FrzA基因转染可有效抑制Wnt信号通路相关信号分子的表达并有效抑制心肌细胞凋亡。rAA9-eGFP尾静脉转导后可在心肌组织中靶向高效表达，并对机体其它器官组织无不良影响；明确病毒注射的最佳剂量为1×1011vg/只，确定心肌表达的高峰时间点为35天。rAAV9-FrzA基因靶向转导后可高效抑制老龄缺血性心衰小鼠心肌中Wnt信号通路的过度激活，启动心肌内源性保护反应机制，显著降低老龄心衰小鼠的死亡率，有效抑制老龄心肌的纤维化程度和心室过度重塑，并改善了心功能。为防治老龄心力衰竭患者心肌损伤、改善预后提供新的思路和干预靶点。