花生根瘤菌转吸氢基因研究

用含豌豆根瘤菌吸氢基因的重组质粒PA< 618为目的基因，通过三亲本杂交，将吸氢基因转入花生根瘤菌和毛豆根瘤菌。在自生条件下，花生根瘤菌的结合株吸H2活性提高15倍，毛豆根瘤菌受体株不吸H2，结合株的H2活性为75μmolH2·g.prot（-1）.h（-1）。结合株面接的花生和毛豆后，花生根瘤吸H2活性提高2倍，毛豆根瘤吸H2活性提高4.6倍。从具有吸H2活性的花生根瘤L8-3菌株为出发菌株，W具有多克隆位点的P<AFR3为载体，构建了花生根瘤菌的基因文库。用PCR筛选和以豌豆根瘤菌吸氢酶结构基因为探针，筛选出PCR及探针杂交双阳性的重组子，酶切分析重组子携带外源DNA为18-32kb，它可能含有所需要的花生根瘤菌的吸氢基因。