花生根瘤菌氢酶基因及高表达吸氢菌株的研究

对含有花生根瘤菌吸氢酶基因的重组质粒Pz-55分别用BamhI,ECorI和Kpn-1作酶切分析，构建其物理图谱。通过DNA杂交和PCR分析，发现Pz-55中的6.4ECORI片段，可能是结构基因。对6.4Kb片段分别用ECORI和KPNI酶切，得到2.1，2.1和1.9Kb三个片段，对这三个片段进行亚克隆并测序。通过三亲本质杂交将含有PZ-55的重组质粒转移不吸氢的花生根瘤和毛豆根瘤菌，转移结合株在自生条件下表达吸氢活性。将含有PZ-55的转移结合株于大田回接花生，获得在共生条件下表达吸氢活性，根瘤吸氢活性比对照组提高4倍，固氮活性也有所提高，得到叶片干重，叶片含氮量，种子含氮量和产量比对照组分别增加5%，8.2%,9.2%和8.8%的初步结果。