免疫相关因子球样受体-2（TLR2）及beta-arrestin 2在子宫内膜癌发展转移中的作用机制研究

子宫内膜癌（EC）是妇科常见恶性肿瘤，早期患者治疗后预后较好，晚期及复发者死亡率明显升高。其复发转移机制尚不清楚。研究表明，肿瘤的转移和进展与机体免疫功能关系密切。球样受体家族(TLRs)在人体的固有免疫中发挥重要作用。最新研究提示，TLR2通路的激活可促进肺癌的转移（2009，Nature）。β-arrestin 2（Arr2）可调节TLR2的信号转导，但二者在EC复发和转移中是否起作用及其分子机制尚不明确。本研究主要目的：明确TLR2与Arr2的调控关系及其在EC发展转移中的作用及信号转导机制，验证Arr2过表达对EC发展及化疗药物效果的影响。研究的主要内容：体外研究Arr2与TLR2对EC细胞侵袭力的影响及信号转导通路；人体组织标本研究二者与EC复发转移的关系；建立稳定转染Arr2过表达及对照EC细胞系，建立小鼠EC模型，研究Arr2对肿瘤生长速度和紫杉醇效果的影响

子宫内膜癌是妇科常见恶性肿瘤。晚期及复发癌患者预后差。近年来免疫及炎症性介质与恶性肿瘤之间的关系受到关注。一些免疫因子及炎症因子可能通过微环境的变化引起肿瘤细胞的增殖及转移。β-arrestin参与机体的免疫调节。TLRs家族是机体自身免疫识别外界病原的重要受体家族。研究表明，TLR2及β-arrestin在恶性肿瘤的复发转移中起着重要作用，但关于β-arrestin 和TLR2如何在肿瘤的发生中共同起作用尚无报道。.主要研究内容：.1.体外实验.① 建立稳定转染β-arrestin 2全长质粒、β-arrestin 2-SiRNA质粒和空白对照质粒（GFP）的子宫内膜癌细胞HEC1B和Ishikawa细胞系。.② western blot法检查β-arrestin 2与TLR 2调控关系及AKT、GSK3β、MMP-9（金属基质蛋白酶-9）、NF-KappaB、 TNF-α 等在通路中的作用。.③ ELISA法检测过表达β-arrestin 2炎症相关因子IL-6，IL-8及VEGF的变化。.④ 体外比较各组细胞的转移和侵袭能力、增殖力及凋亡；.2.体内实验.◆ 人体组织标本实验.免疫组化法测定β-arrestin 2与TLR2及VEGF的在人子宫内膜癌组织表达。分析其与子宫内膜癌发生、发展及复发转移的关系。.◆ 动物实验.① 建立裸鼠子宫内膜癌模型，分为β-arrestin 2过表达组和对照组：比较各自组成瘤情况、生存期及抗肿瘤药物对其的影响。.② 肿瘤组织中TLR 2、TNF-а、AKT、GSK3β、NF-KappaB、 casepase 3、casepase 9、IL-6、IL-8测定。.关键数据及其科学意义. 1. 过表达β-arrestin 2后，TLR2表达增加，一些炎症介质表达量增加，细胞增殖力及侵袭力增加，凋亡减少，提示β-arrestin2可促进子宫内膜癌细胞增殖，抑制凋亡，并可能通过TLR2介导的炎症途径。 2. β-arrestin 2和TLR2与子宫内膜癌的复发转移可能相关，并通过血管生成因子期作用。3. β-arrestin 2全长组小鼠肿瘤模型的肿瘤体积明显大于对照组，生存期短于对照. 本研究结果揭示，β-arrestin 2可通过TLR2途径促进TNF-α分泌，激活NF-kB，促进肿瘤细胞释放炎性因子，从而促进子宫内膜癌的进展。