PPARα、CYP7B1 和雌激素受体α、β之间的调控与妊娠肝内胆汁淤积症发病关系的实验研究

妊娠肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy, ICP）主要危害是围产儿并发症发生率高，但发病机制不明。前期研究已经发现雌激素受体及PPARα、CYP7B1在ICP中有异常变化。为进一步了解其相互关系，本课题构建雌激素受体α、β基因小干扰RNA表达载体，应用此技术阻断体外培养的肝细胞以及复制的ICP大鼠动物模型肝雌激素受体α基因、β基因，采用实时荧光定量PCR、荧光原位杂交、Western blot等分子生物学及病理形态学技术观察PPARα、CYP7B1、MRP2、 BSEP基因及其蛋白表达的变化规律以及对ICP胆酸代谢、肝细胞病理变化产生的影响。通过以上的研究并结合前期的研究结果，进一步探讨雌激素-雌激素受体- 核受体FXR/PPARα- CYP7A1/CYP27A1/ CYP7B1-MRP2/BSEP调节轴在妊娠肝内胆汁淤积发病中的作用

妊娠肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy, ICP）主要危害是围产儿并发症发生率高，但发病机制不明。前期研究已经发现雌激素受体及过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor ，PPARα）、氧固醇7羟化酶（oxysterol 7-hydroxylase，CYP7B1)、胆固醇7羟化酶（cholesterol7-hydroxylase，CYP7A1）、胆固醇12羟化酶（sterol12-hydroxylase，CYP8B1）、法尼醇X受体（farnesoid X receptor，FXR）在ICP中有异常变化。本研究进一步探讨其相互调控关系及胆盐输出泵（BSEP）和多耐抵抗性蛋白（MRP2）的变化。本课题阻断体外培养的肝细胞以及复制的ICP大鼠动物模型肝雌激素受体α基因、β基因，采用实时荧光定量PCR、荧光原位杂交、Western blot等分子生物学及病理形态学技术观察PPARα、CYP7B1及CYP7A1，CYP8B1，FXR、BSEP,MRP2,ERα和ERβ基因及其蛋白表达的变化规律以及对ICP胆酸代谢、肝细胞病理变化产生的影响。本研究发现ICP组与正常孕鼠组相比较，PPARα、BSEP、MRP2表达下调而FXR、CYP7B1、CYP7A1及CYP8B1表达增高，血清生化指标包括ALT、AST、TBA及BIL具有显著升高，而阻断ICP组雌激素受体α后，与正常组相比较，上述研究指标未观察到有明显统计学意义的改变，而阻断雌激素受体β后，上述研究指标与正常组相比有统计学意义。我们认为雌激素受体α的变化介导了肝内胆汁淤积症的发生，且雌激素受体α参与调节了核受体PPARα、CYP7B1、BSEP,MRP2的表达，阻断雌激素受体后直接或间接地导致了CYP7B1、CYP7A1及CYP8B1,FXR表达下调，因此我们认为存在以雌激素受体为中心的雌激素—雌激素受体α—核受体FXR/PPAR—CYP7B1/CYP7A1/CYP8B1/BSEP,MRP2调节轴，并且该调节轴参与妊娠期肝内胆汁淤积症的发生发展，这为我们进一步探讨该疾病的发病机制提供新的实验依据。