蜜蜂球囊菌几丁质酶特性及其在侵染蜜蜂过程中的作用

蜜蜂球囊菌是引起蜜蜂白垩病的病原真菌，危害严重，但其致病机理国内外还没有研究报道。几丁质酶对昆虫中肠围食膜结构的破坏是各种病原微生物侵染宿主的一个普遍机制，几乎所有的昆虫病原真菌都能够产生几丁质酶。本研究利用分子生物学和免疫组织化学方法对蜜蜂球囊菌几丁质酶对围食膜的作用进行析。研究内容包括：1. RT－PCR技术克隆分析几丁质酶基因cDNA序列，利用核酸杂交（Southern和Northern Blot）等技术对基因的结构、拷贝数以及转录时相等问题进行研究，利用ELISA技术对基因在蛋白水平的表达进行研究。2. 几丁质酶的分离和体外表达产物的测活，通过体内、外试验确定几丁质酶对围食膜的作用。3. 利用免疫组织化学技术确定该基因在球囊菌上的表达位置和侵染过程中在围食膜上表达和分布。以期探明蜜蜂球囊菌几丁质酶的特性及其在侵染蜜蜂幼虫过程中的作用，为该病的防治提供理论依据。