巴东醉鱼草杀虫活性成分及作用机理研究

通过杀虫活性初步筛选，发现巴东醉鱼草乙醇提取物对3龄粘虫显示强烈的生物活性。为了更深入地研究该植物的杀虫活性成分及杀虫作用机理，本项目在前期研究的基础上，采取最佳提取工艺流程，确定杀虫活性有效部位，然后拟采用活性跟踪法系统地分离其中的杀虫活性成分，并采用波谱学手段鉴定活性化合物的结构；用典型试虫来测试活性化合物的杀虫活性，研究其杀虫谱和杀虫作用方式，进一步采用生物化学、分子生物学的方法探明高活性化合物的作用机理，为新型农药的研究与开发提供必要的理论基础。

巴东醉鱼草95%乙醇提取物的石油醚萃取相（A）和乙酸乙酯萃取相（B）对供试的3种鳞翅目害虫和朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus B. 均有较强的生物活性。乙酸乙酯萃取相在24 h对3龄小菜蛾Plutella xylostella L.幼虫的拒食率达到94.22%，48 h时对4龄菜青虫Pieris rapae L.幼虫的拒食率达到83.94%，对3龄粘虫Mythimna separata W.幼虫的24 h AFC50为2.4185 mg•mL-1，对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus B. 4 h LC50为0.2108 mg•mL-1。石油醚萃取相72 h对3龄小菜蛾Plutella xylostella L. 幼虫的拒食率为64.11%，48 h对4龄菜青虫Pieris rapae L.幼虫的拒食率为75.18%，对3龄粘虫Mythimna separata W. 幼虫48 h AFC50为1.1392 mg•mL-1最高，对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus B. 4 h LC50为 0.3606 mg•mL-1。.采用活性跟踪法分离，从石油醚萃取相中获得4个化合物，从乙酸乙酯相中获得10个化合物，共14个化合物，其中高活性化合物2个，分别为对伞花烃（化合物1）和苯甲酸甲酯（化合物2）。.进一步的活性研究结果表明，对伞花烃（1）和苯甲酸甲酯（2）对粘虫、苍蝇等有一定的熏蒸作用，对酢浆草如叶螨和玉米蚜有很好的毒杀作用。观察了对伞花烃对粘虫的致毒症状，并测定了其对粘虫乙酰胆碱酯酶（AChE）、Na -K -ATP酶、谷丙转氨酶（GPT）等神经系统酶系的影响，结果表明，对伞花烃可能作用于神经系统，乙酰胆碱酯酶和Na -K -ATP酶与对伞花烃的作用靶标有关，而谷丙转氨酶则不是对伞花烃的作用靶标。同时，还测定了对伞花烃对粘虫体内羧酸酯酶（CarE）、谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）、P450 O-脱甲基酶（P450 O-demethylase）、磷酸酯酶（ACP, AKP）等几种代谢酶系的影响，结果显示，对伞花烃处理粘虫后其体内的代谢酶CarE和ACP被激活，而GSTs、P450 O脱甲基酶和AKP则被抑制，特别是GSTs和P450 O脱甲基酶，其抑制率达到40%以上。.综上所述，对伞花烃具有良好的杀