肝细胞聚集体的培养系统和生物人工肝反应器的构建

以大鼠肝脏为供体，分离出高活力的肝实质细胞，采用琼脂等材料涂覆培养表面，使用激素限定培养基通过静态培养方式培养出具有高代谢活性的肝细胞聚集体，其白蛋白的分泌等代谢活性高于单层培养细胞二至三倍。以琼脂、明胶、壳聚糖等具有优良生物相容性的天然材料为原料合成了不同孔径的大孔微载体，并以化学法及等离子体等物理方法进行修饰，制备了促细胞粘附的优良微载体。采用连续旋转培养方式，在大孔明胶微载体表面培养出类组织结构的肝细胞聚集体，进一步提高了肝细胞的密度并促进了代谢活性的发挥；在此基础上初步构建了中空纤维反应器与微载体培养肝细胞聚集体相结合的体外人工肝灌流装置。