Tenascin-C在炎症因子诱导肝癌转移中的作用及机制研究

肝癌的高转移是导致患者治疗失败以及死亡的重要原因。目前发现存在肝脏慢性炎症的患者其肝癌转移的机率更高。.我们的前期体外研究结果发现，炎性因子TNF-α能显著增强Tenascin-C（TNC）在肝癌细胞的表达，并且 TNC的高表达能明显增强肝癌细胞的迁移能力。本研究将通过比较有无转移的肝癌患者肝癌病理组织的TNC及TNF-α的表达差异，明确TNF-α和TNC的表达与肝癌转移的关系；并将建立稳定表达肝癌细胞株，通过体内外试验，进一步研究TNC的表达在促进肝癌转移中的作用机理；通过分别或同时阻断肝癌细胞内NF-kappa B和JNK信号通路，探明TNF-α诱导肝癌细胞表达TNC的具体分子机制。.该研究将有助于阐明肝脏的慢性炎症是否通过炎性因子TNF-α活化肝癌细胞表达TNC这一机制增强肝癌细胞的转移能力，可望为防止肝癌转移提供新的治疗途径和靶点。

很多研究发现在肿瘤细胞转移过程中，整合素及其配体发挥重要作用。而在整合素的配体中，Tenascin-C（TNC）是其中一个非常重要的配体， TNC通过与整合素的相互作用调控细胞粘附及迁移。近年来研究表明，在脑胶质瘤、乳腺癌等恶性肿瘤中内TNC的过量表达伴随着肿瘤细胞的高侵袭转移能力。但是对于肝癌中TNC的表达情况及作用研究较少。有限的资料表明在发生转移的肝癌中表达TNC的表达上调。特别是炎性因子促进肝癌转移是否与TNC的表达相关目前尚无资料。本研究收集了50例未发生转移的肝癌组织和50例已经发生转移的肝癌组织，通过免疫组化明确肝脏慢性炎症和TNC的表达与肝癌转移之间的相关性，并进一步通过体外实验和动物实验，明确炎性因子是否通过上调TNC的表达促进肝癌转移以及其具体分子机制。.研究结果发现，肝癌有转移组及肝癌无转移组者两组患者的资料在性别、年龄、乙肝病史、E抗原状态及是否有肝硬化基础方面均无统计学差异，两组资料在ALT是否异常，肿瘤分级及肿瘤组织病理类型分化程度上有统计学差异。免疫组化的结果显示，TNC在有转移和无转移的肝癌组织内的表达水平不同，在发生转移的肝癌组织内TNC表达强度明显高于未发生转移的肝癌组织。TNC表达主要以肿瘤细胞内以及周围的细胞间质内；肝癌组织中MVD（微血管密度）表达以及炎症的强度与TNC的表达呈正相关。通过生存曲线分析发现TNC的表达水平与肝癌患者的预后有关，有可能作为一个较好的预测指标帮助临床判断肝癌患者预后。.构建TNC-shRNA干扰质粒和pcDNA-TNC过表达质粒，转染HepG2细胞后，筛选建立稳定抑制TNC表达的HepG2肝癌细胞株和TNC稳定表达的HepG2肝癌细胞株。体外结果均发现TNC稳定表达的HepG2细胞的迁移和侵袭能力强于TNC表达被稳定抑制的HepG2细胞，并且炎性因子并不能增强TNC被稳定抑制的肝癌细胞株的迁移和侵袭能力；体内动物实验结果发现，TNC稳定表达的HepG2肝癌细胞株经尾静脉注射后，肺转移瘤的数目多于TNC表达被稳定抑制的HepG2肝癌细胞株。.进一步对TNF-a诱导TNC高表达的分子机制研究发现，炎性因子TNF-a可以通过活化NF-κB信号通路而不是JNK信号通路上调HepG2细胞内TNC的表达，并从而增强HepG2细胞的迁移和侵袭能力..综上所述，炎性因子诱导的TNC的高表达促进了肝癌的转移