CD4+CD25+调节性T细胞在干眼发病的免疫调节机制及抗CD3抗体的免疫治疗

干眼是常见眼病,损伤眼表，危及视力。其尚未明了的发病机制局限了干眼的有效治疗。我们前期研究发现干眼患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞（CD4+CD25+Treg）数量较正常者低；IL-10治疗可减轻干眼。据此我们提出假设：CD4+CD25+Treg异常与干眼发生密切相关, 其数量和功能缺陷诱发和加重泪液系统炎症和组织损伤。本课题组已成功复制兔自身免疫干眼病模型，研究干眼结膜及泪腺内CD4+CD25+Treg的数量和功能变化，完善泪液系统免疫调控的相关理论；结合临床体征、细胞因子、组织病理，分析泪液系统CD4+CD25+Treg维持免疫平衡中的作用；注射抗-CD3抗体提高泪液系统CD4+CD25+Treg数目，对改善泪腺眼表炎症及功能的作用。揭示CD4+CD25+Treg在干眼发病、病程进展中的变化及可能的作用机制，从中找到新的靶点，为干眼症的预防和新药开发提供依据。

干燥综合征（Sjögren’s syndrome，简称SS）样自身免疫泪腺炎是主要累及唾液腺和泪腺等全身外分泌腺的慢性炎症性自身免疫病，是较为严重和难治的干眼类型，其确切发病机制至今仍不明确。本研究通过优化静脉注射自体激活的外周血淋巴细胞建立兔自身免疫性干眼模型，模型组兔出现干眼相关临床指征和病理表现，随诊八周病情稳定，进而较为逼真的模拟了人类Sjögren’s综合症。自身免疫干眼模型兔泪腺中致病性T细胞与调节性T细胞（Treg）免疫平衡被打破，细胞因子的水平发生变化，炎性细胞因子表达升高，具有抑制炎症作用的细胞因子表达降低，导致泪腺组织内的炎症持续甚至进展。本研究进行抗CD3抗体的免疫治疗，整个实验过程中未观察到对干眼模型组有明显的治疗效果。我们结合近年来研究成果，首次尝试应用脂肪来源的间充质干细胞（ADSCs）治疗自身免疫干眼。以全身静脉输注间充质干细胞的治疗模式对干眼模型进行治疗，并进行临床、组织病理学和免疫学的检测，发现治疗组泪液分泌增加、泪膜破裂时间增长，角膜着色减轻，泪腺和结膜组织HE染色均显示淋巴细胞浸润减轻。治疗组泪腺中炎性因子IFN-γ、IL-17、IL-6、TNF-α的表达呈不同程度降低，抑炎因子IL-10、TGF-β的表达上升。流式细胞仪检测泪腺组织中Treg 细胞的比例升高。在体外间充质干细胞与经泪腺上皮细胞激活的效应性T细胞共培养后检测其增殖情况，发现间充质干细胞在体外能够抑制致病性T细胞的增殖，并其增加T细胞中treg细胞的比例。静脉输注间充质干细胞能降低干眼模型发病程度，对兔自身免疫干眼模型有一定的治疗作用。