AcSDKP抗矽肺纤维化作用的比较蛋白质组学研究

矽肺是我国主要的职业病之一，发病率与死亡率较高，严重影响着我国劳动生产力和人民的身体健康，因此对矽肺防治的研究十分重要。我们前期研究发现AcSDKP具有抗矽肺纤维化的功能并对其作用机制进行了初步探讨。然而，AcSDKP抗矽肺纤维化机制颇为复杂。比如，涉及到矽肺炎症反应、细胞外基质代谢、细胞信号转导通路等方面的一些关键蛋白在纤维化形成中的作用和机制还不清楚。本项研究以SiO2粉尘灌注制作大鼠矽肺模型，采用比较蛋白质组学技术，由动物血浆和肺组织内筛选差异蛋白，寻找与AcSDKP抗矽肺纤维化疗效相关的血清学生物标志物和矽肺肺组织中与病变相关的特异蛋白质，以探寻AcSDKP抗矽肺纤维化作用的新靶标，阐明其作用机制，并为未来将其研发成为抗矽肺纤维化的新药提供实验依据。同时，此项研究也为矽肺病的防治提供了一条新思路，也将为其他器官纤维化防治提供一些有价值的信息。

矽肺是由于长期吸入大量游离SiO2粉尘，以肺内形成矽结节和弥漫性间质纤维化为特征的肺部疾病，是较为严重的职业病。在世界范围内，尤其是我国矽肺病仍然较为普遍存在。尽管多年来对矽肺的发病机制与防治研究做了大量的工作，但迄今为止有关矽肺的发病机制仍不十分清楚。对矽肺病发病机制与防治研究一直是职业病研究领域的重点、难点和热点课题。课题组多年来一直致力于矽肺的发生机制及其抗纤维化短肽（Ac-SDKP）防治矽肺纤维化作用与机理的研究。在本项目资助下，课题组采用矽肺大鼠模型结合细胞培养的方法，（1）从Ac-SDKP对多种促纤维化信号转导通路（包括p38 MAPK、ERK1/2、JNK和AKT）的阻断作用入手，探讨了Ac-SDKP抗矽肺纤维化作用及其可能的机制。发现Ac-SDKP能够通过对TGF-β1、PDGF和Ang II介导的致矽肺纤维化关键信号转导通路的调控，而抑制炎症反应、肺间质成纤维细胞增殖、肌成纤维细胞分化和胶原沉积。肌成纤维细胞是矽肺发生过程中最重要的效应细胞，而肺成纤维细胞以及肺泡II型上皮细胞向肌成纤维细胞分化是矽肺发生、发展的关键环节。因此，研究与探讨Ac-SDKP对α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及其上游转录调控因子——血清应答因子（SRF）的调控在肌成纤维细胞分化中的作用是课题组研究的重点内容之一。（2）利用蛋白组学技术手段，发现了肺组织中33个差异蛋白可能与矽肺发生、发展关系密切，而部分蛋白可能是Ac-SDKP作用的靶蛋白。并且发现了5个血清学差异蛋白，可能是候选血清学标记物。这些差异蛋白多涉及细胞增殖、凋亡、炎症、氧化应激和上皮—间质转化。（3）课题组较系统的研究了肺组织差异蛋白与肌成纤维细胞分化以及与矽肺纤维化形成间的关系。其中发现Ac-SDKP能够通过对Rho/ROCK信号的阻断，抑制肺成纤维细胞和肺泡II型上皮细胞向肌成纤维细胞的分化。课题组还发现Ac-SDKP能够通过对ADRB2/Epac信号的调控（调控cAMP直接激活的Epac1蛋白，抑制SRF及其转录辅因子MRTF-A的表达），抑制Ang II诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化。课题组的这些研究为拓宽矽肺发生机制与防治研究提供了新的思路。