基于NF-kB网络探讨益气固本方抑制哮喘气道重塑的作用机制

The primary basic pathophysiological changes of pediatric asthma are chronic airway inflammation and airway remodeling. The airway remodeling plays an important role in the pathogenesis of asthma. The recurrent attacks and the severty of asthma are associated with airway remodeling as well as the multiple signal transduction pathways. NF-kB is the important signal transduction pathways. Traditional Chinese Medicine indicates that the origin of recurrent attacks of asthma is abiding phlegm, caused by the deficiency of lung-qi, spleen-qi and kidney-qi. Yiqiguben capsule is an experienced prescription made by national famous professor WangLie, can benefit the lung-qi , the spleen-qi and the kindey-qi to remove abiding phlegm so as to reduce the recurrence rate, which is coincident to the therapeutic principle of treating disease from the root. Previous experiment researches have certified that Yiqiguben capsule can treat asthma, regulate related signaling pathway upstream signal and the balance of immune system. So, this study put forward a hypothesis that Yiqiguben capsule cures asthma namely from the root- - "dispel abiding phlegm" by regulating NF - kB pathways related factors to inhibit airway remodeling. This experiment will study the mechanism of Yiqiguben capsule regulating NF - kB pathways related factors on the technology of MTT,flow cytometry, fluorescence quantitative PCR, and immunohistochemistry, so as to explore the mechanism of inhibiting airway remodeling by Chinese herb, and provide experimental basis for the study of the therapeutic principle of TCM and the multiple target action of Chinese herb.

小儿哮喘病基本病理生理改变是以慢性气道炎症和气道重塑为主，后者在哮喘的发病机制中起重要作用。哮喘反复发作特点及病情轻重与气道重塑有关，且多条信号转导通路与之关联，NF-kB是关键的信号转导通路。 中医认为，哮喘病反复发作与"宿根"- - 伏痰相关，是由肺脾肾虚所致。国家名医王烈验方益气固本胶囊，具有调补肺脾肾作用，祛除宿根而减少复发率，符合治病求本治则。前期已进行实验研究，证实具有治疗哮喘和调控相关信号通路上游信号及调节免疫平衡作用。因此本研究提出假说，益气固本胶囊发挥治本即"祛除宿根"作用，可能是通过调控NF-kB通路相关因子从而抑制气道重塑实现。 故拟采用古今文献梳理、MTT法、流式细胞术、荧光定量PCR、免疫组化等方法，进行益气固本胶囊调控NF-kB信号通路相关因子，进行中药抑制气道重塑的作用机理研究，为中医治则研究和中药多靶点作用提供实验依据。

哮喘是常见的呼吸系统疾病，由于其反复发作、难于根治，严重影响哮喘患者的身体健康，因此受到了广泛的关注。本课题以哮喘相关中医理论及发病机制为主要研究内容，按照任务书要求开展了理论和实验研究两方面内容。. 理论研究以国医大师王烈教授防治哮喘创新性理论研究作为中心内容，对其提出的小儿“哮喘苗期”理论、“三期分治”理论及“哮痰”理论从其立论依据、临床依据、干预治疗方药分析及研究意义等方面进行系统总结，同时对基于“三期分治”理论防治哮喘的5种系列方药分别从发作期、缓解期、稳定期对其用药频次、四气五味等进行深度挖掘和用药规律分析，丰富了中医防治儿童哮喘的理论内涵，同时也为传承国医大师学术经验提供了理论依据。此外，还开展了哮喘的古代和现代文献研究，初步完成哮喘古代文献数据库建设，并对中医药防治小儿哮喘临床研究及核转录因子κB对气道平滑肌作用机制研究进行了梳理总结。. 实验研究方面开展了哮喘稳定期用药—益气固本方（益气固本胶囊）体内和体外两方面研究。实验研究结果表明：益气固本方（益气固本胶囊）可以改善哮喘小鼠的一般状态，减轻肺组织炎症细胞浸润及上皮黏膜层、平滑肌层及气道壁增厚等气道重塑的病理改变，抑制气道平滑肌细胞增殖，并且对NF-κB信号通路上游信号因子IL-1β、TNF-α，关键信号因子NF-κBp50、NF-κBp65、IKK、IκBα及下游信号因子ICAM-1、VCAM-1具有一定的调节作用，研究还发现益气固本胶囊对气道平滑肌细胞分泌的TGF-β1、VEGF、P38也具有一定的调节作用。通过本次实验明确了益气固本胶囊治疗哮喘的作用靶点，阐释了中药根除哮喘反复发作、改善预后的作用机制，丰富了中医基于“宿根伏痰”理论治疗哮喘的科学内涵，为研发防治哮喘的有效中成药提供了实验依据。. 撰写研究论文15篇，其中已发表10篇、已录用2篇、待发表3篇；培养硕士7名、博士2名，撰写硕士毕业论文6篇、博士毕业论文1篇；制作哮喘古代文献数据库软件光盘一件。