T细胞激活与巨噬细胞极化对视网膜新生血管作用的研究

新生血管(NV)是各种致盲视网膜疾病的主要因素。我们既往的研究发现巨噬细胞（Mf）与视网膜新生血管（RNV）的形成密切相关；并且部分清除小鼠Mf可以抑制RNV形成，但作用机制尚不明确。本课题拟（1）应用白介素10（IL-10）基因敲除小鼠检测Mf被部分清除、极性转变以及RAG2基因敲除（T细胞缺失）对未成熟视网膜病变（ROP）以及rho/VEGF、rho/rtTA-TRE/VEGF转基因诱导RNV的作用。（2）运用IL-10、RAG2基因敲除小鼠在ROP疾病模型下提取视网膜Mf，探索其在病理条件下极性转变、表型和功能转化机制。（3）研究RAG2\IL-10与低氧诱导（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、VEGF受体、核因子（NF-κB）、诱导型一氧化氮合酶（iNOs）等相互作用关系进而探讨免疫炎症促RNV形成的机理。

眼底新生血管（neovascularization，NV）主要包括脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）和视网膜新生血管（retinal neovascularization，RNV），多见于年龄相关性黄斑变性、病理性近视、增殖性糖尿病性视网膜病变、未成熟视网膜病变、以及视网膜静脉阻塞。目前对于眼底NV性疾病的治疗主要为抗血管内皮细胞生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）治疗，但现有的抗VEGF治疗仍然存在着各种各样的局限性。其巨大挑战主要体现在：(1)判断是否联合治疗比单一治疗更有效。(2)设计持续有效的给药途径使其能够有选择、持久的把药物递送到NV最多见的眼后极部。(3)清除或重建病理性和无功能的血管以缓解这些NV性眼病视网膜的缺氧状况。因此寻找新的治疗靶点，对于防盲治盲工作刻不容缓。本课题组通过运用ROP、CNV、rho/ VEGF转基因小鼠等多个动物模型，对眼新生血管与MΦ活化状态的关系进行深入探究，检测并证实了MΦ活化与眼底NV的产生密切相关，而IL-10对缺氧局部MΦ极性转变的调控作用能够促进NV的形成，通过对IL-10基因敲除小鼠的研究证实眼MΦ的清除及极性转变对RNV、视网膜下新生血管及CNV具有抑制作用。另外，课题组研究期间，通过体外细胞实验和动物实验已证实rhEDI-8t和HGFK1对眼NV形成具有抑制作用。以上研究结果为探索眼底NV性疾病的新治疗靶点和治疗途径提供了全面而坚实的实验依据，亦为NV性眼病的治疗研究开拓了新的研究思路。