组蛋白去甲基化酶RBP2在髓系白血病细胞分化中对Myc/Max/Mad靶基因的调控机制

组蛋白修饰对基因调控起重要作用，特别是组蛋白去甲基化研究近年来倍受关注。本课题旨在深入研究组蛋白去甲基化酶RBP2如何在髓系白血病细胞分化中调控Myc/Max/Mad靶基因的表达。我们在既往工作基础上推测RBP2是通过Myc/Max/Mad网络中Mad1的"桥梁"作用被"招募"到靶基因启动子区域，发挥组蛋白H3第4号赖氨酸的去甲基化作用，从而调控基因表达。为证实这一科学假说，我们应用染色质免疫沉降（ChIP）、免疫共沉淀(Co-IP)和小干扰RNA(siRNA)等技术深入研究RBP2是否通过组蛋白去甲基化作用调控Myc/Max/Mad靶基因表达；其去甲基化作用是否通过RBP2结合到启动子区域实现；RBP2又如何结合到启动子特定区域；以及这种结合是否由Myc/Max/Mad转录因子介导等相关问题。这一科学假说的证实将为RBP2在血液系统恶性肿瘤分子靶向治疗方面提供重要理论依据和新的应用前景。

项目负责人已完成项目计划书中5个主要研究内容（1.组蛋白去甲基化酶RBP2在急性髓系白血病细胞分化中是否调控c-Myc靶基因的表达；2.RBP2是否通过组蛋白去三甲基化作用调控靶基因表达；3.RBP2是否通过结合到靶基因启动子区域发挥其去三甲基化作用；4.RBP2是如何结合到启动子特定位点发挥作用及Myc/Mad/Max转录因子在RBP2结合到启动子区域中扮演的角色；5.根据目前国际上这方面的最新研究进展，组蛋白甲基化酶MLL是对组蛋白去甲基化酶RBP2研究有重要意义的补充和拓展）和拟解决的3个关键科学问题（1.髓系白血病细胞分化过程中，RBP2是否通过其H3-K4m3的去甲基化作用调控c-Myc靶基因的表达；2.RBP2是否通过结合在c-Myc靶基因启动子特定区域发挥其去甲基化作用来调控基因表达；3.RBP2是否通过转录因子Mad1被“招募”到其靶基因启动子区域来调控基因表达）。本项目已完成预期研究结果，通过研究证实了提出的科学假说。项目负责人以通讯作者/第一作者发表SCI检索或国内核心期刊学术论文共10篇，其中SCI论文2篇（通讯作者和共同第一作者各1篇），国内核心期刊论文8篇（均为通讯作者），其中4篇已发表，3篇接收,综述1篇。研究论文全国学术年会大会发言2篇、书面交流4篇；省学术年会大会发言1篇、书面交流1篇。其余待发表数据正在整理和撰写中（SCI和国内核心期刊论文预期2篇）。项目负责人在完成既定研究内容的基础上，针对研究中发现的科学现象和目前国际上最新研究动向进行了拓展性研究，并在本项目采用的ChIP技术基础上进一步采用目前最新的ChIP-seq技术，高效地在全基因组范围内检测与组蛋白去甲基化酶RBP2相互作用的DNA区段，为下一步更深层次的研究提供了有价值的数据平台。