基于新型接种制剂自溶型微针的经皮免疫佐剂MPLA（TLR4-L）及ODN1826（TLR9-L）的免疫诱导机制研究

Adjuvant is a class of nonspecific immune enhancers that can enhance the immune response of the antigen and also can change the type of immune response. An excellent immunization effect can be achieved while the amount of antigen and the number of inoculating times are reduced. By using adjuvant, people can work out the predicament of modern vaccine undersupply when a sudden mass outbreak of infectious diseases. The adjuvant that can be used clinically is limited, and it is not suitable for the new type of percutaneous immunization preparation: Biodegradable microneedle arrays (Dissolving microneedle arrays) we developed in our previous research. In view of this, we focus on the Toll-like receptor as a high profile receptor family of pattern recognition receptor, and its ligand TLR-L as a candidate for the transcutaneous immunologic adjuvant. Preliminary study shows that MPLA (TLR4-L) and ODN1826 (TLR9-L) perform the possibility as the transcutaneous immunologic adjuvant. In this project, we will further confirm the adjuvant activity with MPLA and ODN1826 on the basis of previous research to study and evaluate the mechanism of immune induction、safety and stability. This study will provide the theoretical basis and scientific basis for the development of transcutaneous immunologic adjuvant. Construction of the model of transcutaneous immunologic adjuvant for vaccines against infectious diseases will make a contribute to clinical application of MH as a novel transcutaneous vaccination preparation.

佐剂是一类可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的非特异性免疫增强剂，在减少抗原使用量和免疫接种次数的同时能够发挥优秀的免疫效果，可解决现代疫苗在应对传染性疾病的突发性大规模爆发时供给不足的窘境。现在可应用于临床的佐剂种类有限，且均不适用于本课题前期研究中开发的新型经皮免疫接种制剂：生物可降解微针（自溶型微针）。鉴于此，我们着眼于模式识别受体中备受瞩目的受体家族Toll样受体，以其配体TLR-L作为经皮免疫佐剂的候补物质。初步研究表明，MPLA（TLR4-L）和ODN1826（TLR9-L）表现出作为经皮免疫佐剂的可能性。在本课题中，我们将在原有研究基础上，进一步确证两者的佐剂活性，对免疫诱导机制、安全性以及稳定性方面进行研究和评价，为经皮免疫佐剂的开发提供理论基础和科学依据，构建适用于各类传染性疾病疫苗的经皮免疫佐剂模型，以期为该新型经皮免疫接种制剂MH的临床应用做出贡献。

人类发展始终伴随着与病毒和细菌等病原体感染而引起的致命的传染性疾病的斗争。近年来，EBHF、SARS、COVID-19等传统或新型传染性疾病相继在世界各国大规模流行肆虐，与抗生素和抗病毒药物相比，疫苗是唯一能从根本上预防的手段。使用本课题前期研究中开发的新型经皮免疫制剂MH进行的微创接种方法既不需要专业的免疫接种医疗技术人员，也不需要冷链条件进行运输和保存，是一种能够替代传统注射接种法的便捷、经济且安全的新型接种方法。另一方面，由于现代疫苗定义中的抗原主要由病毒、细菌经过培养、精制、灭活等操作制造而成，从开始准备生产到供给于市场需要耗费大量的时间，在应对传染性疾病的突发性大规模爆发时紧急研制并大量供给依然存在较大的难度。而佐剂是一类可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的非特异性免疫增强剂，在减少抗原使用量和免疫接种次数的同时能够发挥优秀的免疫效果，可解决现代疫苗在应对传染性疾病突发性大规模爆发时供给不足的窘境。然而，目前可应用于临床的佐剂种类有限，且均不适用于MH。鉴于此，我们着眼于模式识别受体中备受瞩目的受体家族Toll样受体（TLR），在前期研究中探索了其配体TLR-L作为经皮免疫佐剂的可能性，并初步将选择范围缩小为MPLA（TLR4-L）和ODN1826（TLR9-L）。. 本课题在原有研究基础上，从活体评价以及分子、细胞层面对MPLA和ODN1826的免疫诱导机制、安全性以及稳定性等方面进行了深入研究。结果表明，MPLA和ODN1826作为经皮免疫佐剂具有优秀的佐剂活性，能够增强免疫应答，减少抗原量和免疫次数。一方面，MPLA和ODN1826主要通过诱导细胞因子的分泌增以及共刺激分子的表达增加来促进LC和dDC的活化和成熟，并且可以高效地诱导Th1型免疫应答。另一方面，MPLA和ODN1826作为经皮免疫佐剂应用于MH时也表现出了良好的皮肤、全身安全性和优异的稳定性。本课题为经皮免疫佐剂的开发提供了理论基础和科学依据，构建了适用于各类传染性疾病疫苗的经皮免疫佐剂模型，为该新型经皮免疫接种制剂MH未来的临床应用做出了一定的贡献。