钙离子信号转导机制在二乙酰吗啡致心律失常中作用的研究

本项目基于我们前期研究及相关文献，探讨二乙酰吗啡诱发心律失常的信号转导机制及相关基因调控。在二乙酰吗啡诱发培养大鼠心肌细胞心律失常的模型上；采用膜片钳技术及LSCM技术，研究心肌细胞内ICa-L变化与何种阿片受体有关、是否经磷酸肌醇信号传导通路；观察[Ca2+]i的改变与何种类型的Ca2+通道及阿片受体相关、是否诱导SR内储Ca2+释放，以及细胞膜电位(MP)和线粒体膜电位(MMP)的改变与Ca2+之间的关系；采用RT-PCR和western blot技术分别检测CaMKⅡα的mRNA及蛋白表达，揭示钙离子信号转导途径中关键蛋白激酶的活性状态；并通过DDRT-PCR等方法筛选与心律失常相关钙离子基因表达，研究钙离子信号传导通路的关键基因调控机制。深入探讨二乙酰吗啡致心律失常的分子机理，为法医学、临床防治及药物作用的靶点研究提供科学依据。