活血软坚方对兔颈脊髓慢性受压纤维化GFAPmRNA表达的影响

脊髓慢性受压后发生一系列变化，同慢肝纤维化、SARS肺纤维化相似，其变化的结局是损害部位纤维化，但脊髓纤维化未引起足够重视，脊髓受压后由痿证变为痉证多为痰瘀互结，经络不通、气血不畅，中医认为久病入络，久病多痰多瘀，中药在活血化瘀、抗纤维化方面有优势，在抗脊髓纤维化方面值得研究。通过建立兔脊髓慢性受压动物模型运用分子生物学、脊髓微血管显影、免疫组化、电镜等技术和方法观察颈髓慢性受压后星形胶质细胞的状态、胶原纤维酸性蛋白mRNA、神经丝蛋白表达、脊髓组织超微结构等反映脊髓纤维化及神经元微环境改变的指标，选择脊髓组织PGI2/TXA2、微血管显影、血管内皮生长因子表达等反映脊髓血供状况的指标，应用病理图象系统分析，探讨脊髓受压后纤维化程度、神经元微环境改变与脊髓血供的关系，应用活血软坚方改善血偱环、抗纤维化观察对受压脊髓血循环、脊髓纤维化、神经元微环境的影响，为中药治疗脊髓受压疾病提供理论依据。

通过建立兔脊髓慢性受压动物模型运用分子生物学、脊髓微血管显影、免疫组化、电镜等技术和方法观察颈髓慢性受压后星形胶质细胞的状态、胶原纤维酸性蛋白mRNA、神经丝蛋白表达、脊髓组织超微结构等反映脊髓纤维化及神经元微环境改变的指标，应用活血软坚方治疗观察对受压脊髓血循环、脊髓纤维化、神经元微环境的影响，结果显示能改善血循环、抗纤维化，改善神经元微环境的影响。.1.慢性受压兔脊髓组织中的TXB2/PGT2、VEGF的含量，脊髓组织微血管显影。.脊髓慢性受压后，脊髓组织的TXA2/PGI2调节失调，脊髓微血管显影减少，分布短小，血循环障碍。活血软坚方组、中药活血方组能调节TXA2/PGI2，促进VEGF表达，脊髓组织微血管显影面积大，有促进血管修复，改善血循环作用，并能改善神经元微环境。.2.兔脊髓组织中的胶原纤维酸性蛋白mRNA、胶原纤维酸性蛋白表达。.研究发现脊髓慢性受压后，空白正常组GFAP阳性细胞和胶原纤维酸性蛋白mRNA表达较低，但对照组有较强的表达，表明损伤后星状胶质细胞增生，胶质瘢痕增多，中药活血软坚方治疗组GFAP表达少于对照组，活血软坚方有抑制星形胶质细胞增生和GFAP表达，减少疤痕形成的作用。.3.尼氏体染色法观察脊髓细胞和星形胶质细胞的改变.观察到兔颈脊髓慢性持续受压后出现脊髓灰质神经元萎缩、脱失，白质广泛脱髓鞘改变，受压严重出现明显纤维化改变。活血软坚方组、中药活血方组神经元计数均比造模对照组多，差别有统计学意义（P<0.05）。.4．采用免疫组化观察神经元神经蛋白的变化；采用透射电镜方法观察神经细胞的超微结构变化。.中药活血软坚方组神经丝染色显示较造模对照组好，提示中药有促进神经元NF表达，改善神经元微环境，恢复细胞间联系的作用。.电镜观察造模对照组见神经元细胞核缩小，核膜“裂隙”样改变，胞核颗粒样改变，核仁不清，粗面内质网脱粒并减少，线粒体少见，细胞器裂解形成空洞。髓鞘板层间大面积解离，有的披裂、板层结构散乱，形成空泡结构。轴浆内各种细胞器崩解。.中药活血软坚方治疗组见神经元体积稍变小，大部分神经元形态基本正常，但有部分出现核膜不清，粗面内质网发生脱粒现象，线粒体肿胀。髓鞘发生脱髓鞘改变，髓鞘板层结构紊乱。轴突结构基本正常，可见微管、微丝及线粒体等细胞器，部分见有细胞器聚集。.中药活血软坚方通过改善受压脊髓血供、脊髓微血管，抗