人高致病性禽流感H5N1病毒通用型疫苗基础研究

高致病性禽流感H5N1病毒已造成数百人的感染和死亡，并且有可能通过变异获得人际传播能力而造成人间流感大流行，这些都严重威胁着人类健康。然而，现有的禽流感疫苗面临着病毒变异对其保护作用的挑战。因此，发展对不同进化分支H5N1病毒具有交叉免疫保护作用的通用型疫苗具有重要的意义和应用前景。本研究基于H5N1病毒高保守的M2e分子，设计具有四分支链并联结构的M2e四分肽疫苗和通过融合表达形成M2e分子三联体与ASP-1佐剂蛋白串联结构的重组亚单位疫苗，进行人高致病禽流感H5N1病毒通用型疫苗基础研究，以期实现疫苗对不同进化分支H5N1病毒的交叉免疫保护，应对病毒变异给禽流感疫苗研发带来的挑战，预防可能由于H5N1病毒变异引发的新一轮人间流感大流行，并为禽流感疫苗研究提供理论和实践依据。

H5N1病毒已通过快速变异形成多个进化分支，使传统的H5N1病毒疫苗应对病毒变异和潜在流行的能力受到了严峻挑战。因此，有必要基于保守的抗原组分发展对不同进化分支H5N1病毒具有交叉免疫保护作用的通用型疫苗。本研究基于H5N1病毒高度保守的M2e抗原组分，以合成具有四分支链并联结构的M2e多抗原肽（M2e四分肽）和重组表达具有M2e与新型佐剂蛋白ASP-1串联结构的融合蛋白为策略，系统开展了H5N1病毒通用型疫苗基础研究。. 本研究设计制备的M2e四分肽能有效增强M2e抗原的免疫原性，应用常规的氢氧化铝佐剂进行免疫能有效诱导对不同进化分支H5N1病毒交叉免疫保护，预示着M2e四分肽设计可有效用于通过合成肽发展的H5N1病毒通用型疫苗。而且，H5N1病毒M2e四分肽可以对甲型H1N1大流感病毒产生交叉免疫保护，预示着基于H5N1病毒M2e发展的通用型疫苗对于预防可能因H5N1病毒变异造成的人间流感大流行具有重要价值。本研究将三联体形式的M2e与具有佐剂活性的ASP-1蛋白融合表达获得的M2e3-ASP-1重组蛋白免疫时不需要使用佐剂就即可有效诱导对不同进化分支H5N1病毒的交叉免疫保护。M2e3-ASP-1与HA联合免疫可以在HA因H5N1病毒变异而不能诱导保护性免疫时具有对变异的H5N1病毒株产生交叉免疫保护，预示着M2e3-ASP-1可以发展成为H5N1病毒通用型疫苗，通过单独使用或与HA抗原联合免疫应对H5N1病毒的变异。. 通过本课题研究，明确了H5N1病毒保守的M2e作为H5N1病毒通用型疫苗靶抗原的重要价值；明确了M2e四分肽和M2e3-ASP-1重组蛋白两种形式M2e疫苗的免疫反应特征和针对不同进化分支H5N1病毒的交叉免疫保护效果；明确了佐剂活性成分对于M2e疫苗效果的关键作用。进而证实了本研究采取的M2e四分肽和将M2e与佐剂活性成分融合表达的设计策略对提高M2e疫苗免疫原性和免疫保护效果的有效性；揭示了这些免疫原性增强策略对于获得和提高免疫保护效果的必要性；预示出在此基础上发展的H5N1病毒通用型疫苗对防控H5N1病毒引起的人间流感大流行具有重要意义。本课题依据任务书的计划和经费预算实施课题研究，顺利完成了研究目标和考核指标。发表研究论文5篇，其中SCI论文4篇。