愈创醇增强NK细胞抗肺癌效应及抑制非小细胞肺癌细胞生长的作用与分子机制

Natural Killer (NK) cell plays an important role in the tumor immunosurveillance,however,tumor cell can efficiently escape from immune effector cells including NK cells. Improving NK cell-mediated recognition and killing of cancer cells to block cancer immune evasion has become into an important novel strategy for the development of antitumor drugs.In previous study, through a large scale of screening of 480 natural products, we found that the sesquiterpenoid guaiol could not only enhance NK cell-mediated recognition and killing of non-small cell lung cancer (NSCLC) cells, but also could directly inhibit NSCLC cell growth. This discovery suggested guaiol might be a potent novel antitumor drug.In this project, we will be focused on guaiol-induced enhancement of NK cell-mediated lysis of lung cancer and inhibition of NSCLC cell growth, and deeply investigate its anti-NSCLC therapeutical efficacy, molecular targets and molecular signal pathaway to elucidate the anti-NSCLC pharmacological effects by comprehensive using molecular biological,immunological and proteomic technologies and methods, such as co-immunoprecipitation, flow cytometry analysis, proteinum chip,and so on. This study will provide theoretical support and experimental evidence for the research and development of guaiol as a novel antitumor drug, and also provide a new strategy for the devolepment of antitumor drugs.

自然杀伤细胞（NK细胞）在恶性肿瘤免疫监视过程中发挥重要作用，而肿瘤细胞却能有效逃避包括NK细胞在内的免疫效应细胞的识别与杀伤。通过提高NK细胞对肿瘤细胞的识别与杀伤而阻断肿瘤细胞逃避NK细胞免疫监视已成为抗肿瘤药物发展的一个重要新方向。在前期研究中，通过对480种天然小分子化合物进行筛选和分析，我们发现倍半萜类化合物愈创醇既能够增强NK细胞对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞的识别与杀伤，同时也能够直接抑制NSCLC细胞生长，是一种有效的新型抗肿瘤药物。本项目将围绕愈创醇增强NK细胞的抗肺癌效应与抑制NSCLC细胞生长两方面的作用，综合运用免疫共沉淀、流式细胞分析、蛋白芯片等现代分子生物学、免疫学和蛋白质组学等技术方法，深入探讨其抗NSCLC的作用、作用靶点和分子信号通路，阐明其抗NSCLC药理作用，为愈创醇作为抗肿瘤新药的研发提供理论基础和实验依据，亦为抗肿瘤药物的发展提供一种新的思路。

NK细胞免疫治疗是一种极具前途的癌症免疫治疗新方法，但癌细胞免疫逃逸限制了其临床效能，如何提高NK细胞的抗肿瘤效应已经成为癌症免疫治疗研究领域的一个重要的前沿课题。本项目中，我们旨在发现能够增强NK细胞抗非小细胞肺癌(NSCLC)效应的中药来源的天然小分子化合物，并阐明其作用分子机制。我们研究发现，天然产物愈创醇虽具有一定抗肺癌效应，但其水溶性较差，成药性不强，价值有限。大戟活性成分3,20-二安息香酸巨大戟萜醇（IDB）能够激活PKC，增加NK细胞的IFN-γ分泌和脱颗粒效应，从而增强NK细胞介导的NSCLC细胞杀伤；且这种增强效应依赖于PKC和IFN-γ。米仔兰活性成分楝酰胺（RocA）能够在体内外增强NK细胞对NSCLC细胞的杀伤，且其体内抗肺癌作用也部分依赖于NK细胞；RocA对NK细胞脱颗粒和死亡受体表达无明显影响，但能够以序列特异性的形式阻遏自噬必需基因ULK1蛋白翻译，从而抑制NSCLC细胞自噬，抬高NSCLC细胞中NK细胞来源颗粒酶B的水平，进而增强NK细胞介导的肺癌细胞杀伤。臭椿皮活性成分臭椿酮无明显增强NK细胞的杀伤的能力，但能够通过下调RPA1表达抑制了DNA复制，从而抑制NSCLC细胞生长，延长荷瘤小鼠生存时间。这些研究发现表明，IDB和RocA具有增强NK细胞抗肺癌效应的能力，而臭椿酮虽不增强NK细胞的抗癌效应，但其自身具有良好抗肺癌潜能，预示着这些小分子化合物在肿瘤治疗中都将具有重要应用前景，极具开发价值。