microRNA-27a和27b过表达在肝星状细胞激活过程中的作用及意义

减少肝星状细胞(HSC)激活或诱导激活HSC表型逆转是治疗肝纤维化的重要策略。microRNA(miRNA)是一类～22nt的内源性单链RNA分子，可诱导转录后基因沉默，在多种生物学过程中发挥重要调控作用，有希望成为基因治疗的新靶点。前期研究发现，体外原代培养自动激活的大鼠HSC中miR-27a和27b表达显著增加；通过anti-miR抑制内源性miR-27a和27b可部分逆转激活HSC的表型，胞浆中消失的脂滴重新出现，细胞增殖受到抑制。本课题将进一步通过cICAT比较蛋白组学方法筛选出HSC中受miR-27a(b)调控和影响的蛋白，对差异表达的蛋白进行功能分类，阐明miR-27a((b)在HSC中的功能，及其促进HSC激活的机制；并在CCl4小鼠肝纤维化模型中调控miR-27a(b)表达，观察其对小鼠肝纤维化发生发展的影响, 探讨miR-27a(b)在肝纤维化治疗中的临床应用价值。

前期研究发现miR-27a(b)在激活肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中的表达显著增高，通过转染anti-miR-27a(b)下调miR-27a(b)的表达能显著抑制激活HSC增殖，胞浆中丢失的脂滴重现。本课题进一步证实在小鼠肝纤维化模型中针对miR-27a(b)的anti-miRNA可降低HSC的激活、减轻肝纤维化的严重程度。并通过比较蛋白质组学的方法分别解析了HSC激活的生物学特征和miR-27a(b)过表达促进HSC激活的分子机制。因过表达miR-27a(b)而引起的差异表达蛋白占所鉴定蛋白总量的8.25%（149/1805），显示了其所具有的广泛作用。生物信息学分析表明上调蛋白主要集中在核酸合成、细胞增殖和成肌分化相关蛋白，下调蛋白主要是脂肪酸合成代谢通路中的关键酶。这些结果切合HSC的激活表型，显示了蛋白质组学策略是miRNA功能研究的有力工具。不仅解释了miR-27a(b)过表达促进HSC增殖，胞浆内脂滴丢失的分子机制，还提示了miR-27a(b)具有促进激活HSC成肌分化的作用，拓展了我们对激活HSC中miR-27a(b)功能的认识。上述研究结果表明miR-27a(b)是肝纤维化基因治疗的理想靶点。