BNIP3在2型糖尿病胰岛β细胞线粒体途径凋亡调节作用的研究

采用大鼠胰岛原代分离及小鼠胰岛β细胞株MIN6传代培养技术，给予不同浓度的葡萄糖、游离脂肪酸干预后，以荧光实时定量PCR、免疫印迹、流式细胞仪分析、激光共聚焦显微镜观测等方法，观察细胞线粒体功能和线粒体凋亡通路相关蛋白的表达情况；通过构建真核表达质粒、设计针对BNIP3的siRNA序列，应用细胞转染及RNA干扰技术，分别建立BNIP3高活性或低/无活性的细胞模型，观察葡萄糖、脂肪酸对正常和模型组细胞线粒体功能和线粒体凋亡通路相关蛋白的表达情况，了解糖脂毒性作用下BNIP3对β细胞线粒体及能量代谢的影响，通过线粒体凋亡信号通路寻找潜在的药物作用靶点，为进一步保护胰岛β细胞功能的治疗提供理论依据和研发思路。