番茄叶色黄化、果实耐贮运突变体突变基因的克隆及功能验证

Storability has become the one of main breeding objectives. But because of the narrow genetic background of germplasm resources, breeding materials mainly containing rin or nor late ripening mutant genes.We found the leaf yellow and fruit storability mutant 06883 in 06884. The mutant leaves yellow and fruit pre whitening, a significant increase in hardness and has good storability, Compared to the wild-type,there no obvious changes in plant height,flowering stage and fruit weight, The mutant is a good germplasm Resource for good storability. In this study,based on the completion of the initial location of the gene, to obtain candidate genes through fine mapping and map based cloning, combined with the candidate gene transformation in tomato,RNAi interference technology and mutant and its wild type gene sequence alignment identified mutant gene, and get the mutant full-length sequence.This study will provide use of mutant gene for tomato storability breeding and further study the gene turn color on the metabolism and fruit chlorophyll regulatory network lay the theoretical foundation in tomato.

耐贮运育种是番茄当前主要育种目标之一。但由于种质资源遗传背景狭窄，当前主要依然应用含有rin、nor迟熟基因的育种材料。本课题组在田间06884群体中发现了叶色黄化、耐贮运突变体06883，该突变体叶色黄化而且果实前期白化，硬度显著增加，耐贮运方面表现突出，并且在产量、株高和单果重方面与其野生型相比没有大的差异，是优异的耐贮运种质资源。本项目在完成该基因初定位的基础上，拟通过进一步精细定位和图位克隆的方法获得候选基因，结合候选基因转化番茄、RNAi干扰技术和突变体与其野生型基因序列比对确定突变基因，并克隆突变基因全长序列，以期为该基因在番茄耐贮运育种中的利用和进一步的研究该基因对叶绿素代谢及果实转色调控网络奠定理论基础。

耐贮运育种是番茄当前主要育种目标之一。但由于种质资源遗传背景狭窄，当前主要依然应用含有rin、nor迟熟基因的育种材料。本课题组在田间06884群体中发现了叶色黄化、耐贮运突变体06883，该突变体叶色黄化而且果实前期白化，硬度显著增加，耐贮运方面表现突出，并且在产量、株高和单果重方面与其野生型相比没有大的差异，是优异的耐贮运种质资源。本项目通过遗传分析确定该突变性状是由单隐性基因控制，一个基因同时控制叶绿素合成和果实转色2个主要性状在国内外未见报道。本项目通过构建突变体及其野生型材料F2代混池，利用BSA极端性状定位的方法获得15个候选基因，利用DNA标记的手段进行精细定位，计划找到决定该性状的主效基因，定位的主要区段位于番茄第8号染色体上。利用CAPS标记的方法最终确定基因Solyc08g074650为主要控制该性状的基因，通过生物信息学分析及生理指标测定明确了该基因紧密关联于番茄多酚氧化酶，目前正在对其基因进行番茄遗传转化和基因沉默等基因功能验证的工作。该突变体突变基因克隆及功能验证补充了番茄基因库，同时为番茄优异耐贮运种质资源创制、光合通路研究、叶绿体合成与番茄转色间的关系等后续研究奠定理论基础。