SITR1-p53通路在视网膜缺血再灌注损伤中的关键调控作用

视网膜缺血再灌注(RIP)损伤是造成视力损伤和失明的最主要原因之一。青光眼、糖尿病视网膜病变等眼科重大疾病都与RIP损伤相关。申请人前期工作已证明：①动物RIP损伤中同时存在神经和血管凋亡、退化的现象；②糖酵解通路失调是造成RIP损伤的重要原因；③p53、乙酰化p53、SIRT1和PTEN的水平在RIP损伤后有显著变化等现象。作为前期工作的延续，申请人针对目前关于RIP损伤是如何引起糖酵解失调、细胞凋亡和mTOR通路失调，最终导致神经和血管退化等病变机理尚不明确的研究现状，提出采用RIP损伤的动物模型，利用玻璃体显微注射和基因特异性打靶技术，综合研究SIRT1-p53通路是如何通过调控RIP损伤中多种通路的变化而成为引起神经和血管细胞退化的关键的。本研究在理论上将进一步揭示RIP损伤的分子机理，为治疗RIP损伤引起的疾病及探寻相关新药物靶点提供理论依据。

视网膜缺血再灌注(I/R)损伤是造成视力损伤和失明的最主要原因之一。青光眼、糖尿病视网膜病变等眼科重大疾病都与I/R损伤相关。针对目前视网膜I/R损伤引起糖酵解失调、能量代谢损伤、细胞凋亡和mTOR通路失调，最终导致神经和血管退化等病变的机理尚不明确的研究现状，在项目研究过程中，利用本实验室制备的GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，甘油醛-3-磷酸脱氢酶；一种糖酵解途径中重要酶）转基因小鼠，以及在培养的视网膜血管内皮和神经细胞中过表达GAPDH，研究在体内和体外I/R损伤中，GAPDH具有的保护性作用，探讨GAPDH是如何通过减少损伤引起的能量缺失、修复p53-DNA损伤通路和抑制细胞凋亡和坏死，从而抑制视网膜I/R损伤中神经和血管细胞退化的。同时，利用大规模蛋白质组学技术和随后蛋白质印迹法，证明与未受损伤组相比，mTOR通路在受到I/R损伤的视网膜和神经细胞中显著被抑制。此外，通过定量质谱技术，分析了视网膜中的组蛋白，并从中鉴定了34个在I/R损伤后异常变化的组蛋白修饰。发现在I/R损伤的肾脏中组蛋白修饰也有显著变化。在项目执行三年时间中，共发表标注该基金号SCI论文10篇和EI论文1篇，其中影响因子在5.0以上的论文2篇，还有两篇SCI论文在修回中。通过该研究，在理论上进一步揭示视网膜I/R损伤的分子机理，为治疗I/R损伤引起的疾病及探寻相关新药物靶点提供理论依据。