HPS （ep，pe和double）雄鼠生殖力低下的研究

HPS综合症是一组负责蛋白膜泡转运或细胞器生成的基因发生突变引起的多系统综合病症。小鼠pale ear (ep)和 pearl (pe)是HPS的两个典型模型。我们的前期工作发现，这两种小鼠及其双突变（double）雄鼠均表现出不同形式和不同程度的生殖力低下：与正常对照相比，double和pe雄鼠使雌鼠受孕的几率显著降低，ep雄鼠每窝后代数量显著降低，综合起来，这三种雄鼠的后代数量都有显著降低。进一步研究发现，ep和pe小鼠的睾丸和附睾形态、结构没有明显变化，但double的附睾形态结构和精子储存有一定异常；ep雄鼠附睾尾部精子数目明显减少，但ep雄鼠精子顶体酶活力有明显升高。我们将进一步通过各种技术手段，在整体、器官、组织，细胞和分子水平上深入研究HPS雄鼠生殖力低下的具体原因，加深对蛋白膜泡运输和细胞器生成的了解，为临床男性生殖力下降和不孕不育提供新的材料和思路。

HPS 综合症是一组负责蛋白膜泡转运或细胞器生成的基因发生突变引起的多系统综合病症。小鼠pale ear (ep)和 pearl (pe)是HPS 的两个典型模型。我们的前期工作发现，这两种小鼠及其双突变（double）雄鼠均表现出不同形式和不同程度的生殖力低下。我们的研究发现, 在器官水平上，pe小鼠的附睾在1.5月龄出现发育迟缓，一直延续到成年；组织水平上， 1.5月龄pe小鼠的曲细精管中精子数目明显小于B6小鼠，在附睾头切片中，可见pe雄鼠中部分附睾管中无精子存在；生理生化水平上， 3月龄pe雄鼠血清睾酮含量明显低于同日龄B6雄鼠；3月龄pe雄鼠睾丸组织中睾酮下游基因RHOX5表达量明显低于同日龄B6雄鼠。通过计算机辅助精子质量分析（CASA），我们发现获能前ep精子活率较B6有统计学差异，而获能后ep和pe精子活性较B6均有统计学差异。另外，我们还发现pe小鼠精子的头部摆动幅度低于野生型小鼠，而摆动频率高于野生型小鼠。我们还发现，获能处理前B6精子顶体反应率最低，pe次之，ep最高；获能以及孕酮处理后B6精子顶体反应率最高，pe次之，ep最低。在细胞水平上，B6小鼠附睾头部精子中锌离子聚集于后顶体区，而pe和ep小鼠中锌离子分布较为弥散；B6小鼠附睾尾部锌离子聚集于顶体帽区的精子约占1/3，而pe和ep不超过10%。电镜结果显示，pearl（pe）和pearl、pale ear双突变（double）小鼠的顶体在cap phase存在异常。我们还发现在pearl（pe）小鼠的精细胞中有部分中心体（centrosome）错位，在成熟精子中存在有梨形精子。上述结果可以加深对蛋白膜泡运输和细胞器生成的了解，为临床男性生殖力下降和不孕不育提供新的材料和思路。