微型免疫电化学探针实时监测移植物免疫活性细胞的研究

移植器官内免疫活性细胞浸润最能反应移植物排斥反应状况，是排斥反应监测的重要指标，即使排斥反应监测的"金标准"组织穿刺也不能实时反映移植物免疫活性细胞动态变化，且存在一定风险。在前期工作中，我们检测猕猴肾移植物组织中与急性排斥反应密切相关的CD4+、CD8+、CD68+免疫活性细胞，发现其与病检结果反映的急性排斥反应严重程度具有一致性。本课题在此基础上，拟通过表面抗体固定技术，制备对活体组织中免疫活性细胞特异、敏感的微型免疫电化学探针，检测血液中免疫活性细胞（CD4+、CD8+、CD68+细胞），并与流式检测结果对比分析；进一步在B超定位的套管针引导下，将微型探针经皮穿刺实时监测移植器官实质组织中免疫活性细胞动态变化规律，评价其在急性排斥反应预测和早期诊断中的作用。通过实施本课题，阐明移植器官免疫活性细胞动态变化规律及与急性排斥反应的一致性，有望解决临床急性排斥反应早期诊断及治疗的难题。

移植器官内免疫活性细胞浸润最能反应移植物排斥反应状况，是排斥反应监测的重要指标，即使排斥反应监测的“金标准”组织穿刺也不能实时反映移植物免疫活性细胞动态变化，且存在一定风险。在前期工作中，我们检测猕猴肾移植物组织中与急性排斥反应密切相关的CD4+、CD8+、CD68+免疫活性细胞，发现其与病检结果反映的急性排斥反应严重程度具有一致性。本课题在此基础上，通过表面抗体固定技术，制备对活体组织中免疫活性细胞特异、敏感的微型免疫电化学探针，检测血液中免疫活性细胞（如CD4+细胞）；运用电化学还原技术在金表面原位制备不同形状的纳米金颗粒，研究表明纳米金对免疫活性细胞抗体的固载效率与其形状密切相关，在花状纳米金表面，抗体的固载量大、稳定性好、活性高，在此基础上，以K3[Fe(CN)6]为探针，构建了一种新型的快速测定免疫活性细胞细胞的纳米电化学传感器，用于血液样品测试，准确性好。通过本课题研究，成功构建免疫活性细胞免疫探针，评价其在急性排斥反应预测和早期诊断中的作用，阐明移植器细胞动态变化规律及与急性排斥反应的一致性，以解决临床急性排斥反应早期诊断及治疗的难题。