活性氧和一氧化氮介导的胎盘内质网应激在LPS致畸中的作用

前期研究证实LPS诱发小鼠胎盘内质网应激和非折叠蛋白反应。本课题拟进一步研究LPS对内质网应激和非折叠蛋白反应不同信号通路的调控作用，探讨活性氧和一氧化氮在 LPS诱发胎盘内质网应激中的作用。分别用分子生物学技术（GRP78过表达）和药物处置（内质网化学小分子伴侣）方法对抗LPS引起的胎盘内质网应激和非折叠蛋白反应。通过观察抑制内质网应激是否减轻LPS对小鼠胎盘结构和功能的损伤效应，阐明活性氧和一氧化氮介导的内质网应激在LPS引起胎盘损伤过程的作用；通过观察抑制内质网应激是否减轻LPS引起的胎儿生长迟缓和致畸效应，重点阐明内质网应激介导的胎盘结构与功能损伤在LPS致畸中的作用；通过观察GRP78过表达和内质网化学小分子伴侣是否对抗LPS所致胚胎细胞增殖抑制和凋亡加速，进一步探明内质网应激所致胎盘结构与功能损伤介导LPS致畸作用的可能机理。本课题为阐明LPS致畸作用的分子机理提供理论依据。

目的：探讨胎盘内质网应激在细菌脂多糖（LPS）致畸和生长发育迟缓发生过程的作用和机制。主要内容和方法：用LPS构建致畸和胎儿宫内生长发育迟缓小鼠模型，观察LPS对内质网应激和非折叠蛋白反应不同信号通路的调控作用; 用抗氧化剂抑制LPS刺激胎盘产生的活性氧，探讨活性氧在 LPS 诱发胎盘内质网应激中的作用;用内质网化学小分子伴侣对抗LPS 引起的胎盘内质网应激和非折叠蛋白反应，通过观察抑制内质网应激是否减轻LPS 引起的胎儿生长迟缓和致畸效应，重点阐明内质网应激介导的胎盘结构与功能损伤在LPS致畸中的作用；通过观察内质网化学小分子伴侣是否对抗LPS 所致胚胎细胞增殖抑制和凋亡加速，进一步探明内质网应激所致胎盘结构与功能损伤介导LPS 致畸作用的可能机理。结果：母亲孕期暴露LPS诱发胎盘内质网应激和非折叠蛋白反应；抗氧化剂褪黑素、NAC和叶酸明显拮抗LPS引起的胎盘内质网应激；内质网化学小分子伴侣（PBA）对抗LPS 引起的胎盘内质网应激和非折叠蛋白反应; 抗氧化剂（褪黑素、NAC和叶酸）和内质网化学小分子伴侣（PBA）缓解LPS引起的胎儿致畸；抗氧化剂（褪黑素、NAC和叶酸）和内质网化学小分子伴侣（PBA）抑制LPS 所致胚胎细胞增殖抑制和凋亡加速；抗氧化剂（褪黑素、NAC和叶酸）和内质网化学小分子伴侣PBA抑制LPS引起的胎盘叶酸和葡萄糖转运障碍。结论：活性氧介导的内质网应激介导LPS引起的致畸和胎儿生长发育迟缓；活性氧介导的内质网应激损害胎盘发育的胎盘物质转运功能。