NF-kB介导PPARr调控TRPC1、6在慢性低氧性肺动脉高压中的作用

Pulmonary arterial hypertension(PAH) is a malignant progressive disease. It is well established that store operated calcium channels (SOCCs) is an important and common signaling pathway for the pathogenesis of PAH. Our previous study demonstrated that PPARγ exerts roles of anti-proliferation, anti-migration, and proapoptosis in PASMCs, likely by inhibiting the elevated SOCE and TRPC.expression, but the underlying mechanism remains unknown. Based on our previous study and relevant reports, we speculate NF-κB may play a pivotal role in regulating PPARγ-TRPC1、6 signaling pathway. In this study, we construct chronic hypoxia model in vivo and in vitro, and small interfering RNA (siRNA) knockdown and adenoviral overexpression of NF-κB as strategies for validation of the role of the NF-κB in chronic hypoxic PAH and SOCE, further analysis the effect of NF-κB on PPARγ, TRPC1、6 expression and discussed potential signal pathway of PPARγ-TRPC1、6. By illustrating the detail molecular mechanism of how PPARγ can affect the development of PAH, we can explore a theoretical basis for alleviation and treatment PAH.

肺动脉高压(PAH)是一种恶性进展性疾病。钙池调控钙离子通道(SOCCs)的激活是PAH持续发展的重要机制。我们前期证实过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在大鼠肺动脉平滑肌细胞中可通过抑制SOCCs及其重要成员瞬时受体电位通道TRPC1、6的表达发挥抗增殖、抗迁移及促凋亡的作用，但其潜在机理仍不清楚。基于前期基础和文献报道，我们猜测NF-κB可能介导PPARγ-TRPC1、6信号通路而发挥重要作用。本研究拟建立体内和体外慢性低氧模型，采用RNA干扰技术及重组腺病毒载体过表达的功能分析手段，验证NF-κB在PPARγ基因敲除小鼠低氧诱导的PAH模型中作用，明确NF-κB通过TRPC1、6表达影响SOCE的机制，深入解析NF-κB介导PPARγ-TRPC1、6的潜在信号通路，进一步阐明其作用靶点和分子机制，为PAH的治疗与缓解提供理论基础。

肺动脉高压(PAH)是一种恶性进展性疾病。钙池调控钙离子通道(SOCCs)的激活是PAH持续发展的重要机制。我们前期证实过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在大鼠肺动脉平滑肌细胞中可通过抑制SOCCs及其重要成员瞬时受体电位通道TRPC1、6的表达发挥抗增殖、抗迁移及促凋亡的作用，但其潜在机理仍不清楚。基于前期基础和文献报道，我们猜测NF-κB可能介导PPARγ-TRPC1、6信号通路而发挥重要作用。本研究通过建立体外慢性低氧模型，采用沉默和过表达的功能分析手段，验证NF-κB在PPARγ基因敲除小鼠低氧诱导的PAH模型中作用，明确NF-κB通过TRPC1、6表达影响SOCE的机制，深入解析NF-κB介导PPARγ-TRPC1、6的潜在信号通路.结果：（1）低氧抑制PPARγ的表达而促进NF-κB的表达；（2）双荧光素酶报道和ChIP-PCR实验证实TRPC6启动子区域含3个 p65 结合位点和 2个 PPARγ 结合位点；（3）缺氧且沉默PPARγ 促进p65与TRPC6 启动子结合, 而沉默shp65激活PPARγ与TRPC6 启动子结合。结论：PPARγ与NF-κB p65竞争性结合TRPC6的启动子引起PAH相反的后果。该研究对进一步阐明其作用靶点和分子机制，为PAH的治疗与缓解提供理论基础。