MBL2 rs1800450G/A与创伤脓毒症发生风险的临床关联性及其机制研究

Sepsis is one of the most common causes of death in severe traumatic patients. There are still no effective early diagnosis methods. Our meta-analysis and clinic research indicated that MBL2 rs1800450G/A was associated with susceptibility to sepsis, but the mechanism was not clear. So we will expand the sample size with the help of trauma care network system in Hainan province, especially the samples in Li nationalities, and analysis the correlation between MBL2 rs1800450G/A and traumatic sepsis in Han and Li populations. Furthermore, the mechanism of MBL2 rs1800450G/A on the development of traumatic sepsis will be investigated by the detection of MBL2 gene expression and activity, Polymorphonuclear Neutrophils function and activation of complement MBL pathway and the change of protein conformation, which can provide effective targets for early diagnosis and personalized treatment of sepsis and reduce the incidence and mortality of severe traumatic patients with sepsis.

脓毒症是创伤患者后期死亡的最主要原因之一，对人类健康造成巨大威胁，仍缺乏有效早期预警措施。本课题组前期Meta分析及小样本临床关联研究表明MBL2 rs1800450G→A变异增加创伤脓毒症发生风险，其具体作用机制不明。因此我们拟在前期研究基础上，借助海南省创伤救治网络体系，扩大研究人群和样本量，包括汉族和黎族创伤人群，证实MBL2 rs1800450G/A在汉族和黎族人群中与创伤脓毒症发生风险的关联性；进一步从rs1800450G/A对MBL2表达水平和功能活性、中性粒细胞功能、补体凝集素途径活化及MBL2蛋白空间构象的影响等方面系统探讨MBL2 rs1800450G/A影响不同种族严重创伤患者脓毒症发生发展的具体分子机制，为创伤脓毒症的早期诊断以及制定个体化治疗方案提供理论依据和有效靶点，从而减少严重创伤患者脓毒症的发生率和死亡率。

脓毒症是创伤患者后期死亡的最主要原因之一，对人类健康造成巨大威胁，仍缺乏有效早期预警措施。研究显示在感染和脓毒症的发病高危因素中遗传因素是环境因素致病效应的2倍，本课题组进行了大量创伤脓毒症易患性与基因多态性的遗传关联研究，挖掘出了一系列创伤脓毒症易感基因型，并开展了部分重要基因多态性在创伤脓毒症中的功能机制研究。其中也发现甘露糖结合凝集素2（Mannose-binding lectin，MBL2）与脓毒症的关系密切，是研究创伤脓毒症预警诊断方法的重要候选基因。我们将在前期基础上通过Meta分析的方法定量评价MBL基因多态性与脓毒症发生风险的关联性，发现与脓毒症的发生有密切关系的MBL基因多态性位点主要是A/O和+54A/B，而MBL -221Y/X及-550H/L在不同年龄人群或者不同模型中与脓毒症的发生都没有明显的关联性；探讨了我国海南地区人群MBL2基因多态性与脓毒症发生风险的关联性，应用SNaPshot技术检测MBL2的基因多态性，卡方检验哈-温平衡、基因型分布以及与脓毒症的临床关联性，结果提示rs1800450G→A变异显著增加脓毒症发生风险，提示MBL2基因内rs1800450G/A与脓毒症的发生密切相关；初步揭示了MBL2 rs1800450G/A位点影响脓毒症发生发展的相关潜在机制，采用ELISA法检测MBL2 rs1800450G/A各基因型对TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10分泌水平的影响以及各组血浆中MBL2水平，且进一步在MBL2 rs1800450G/A对蛋白质结构稳定性的影响上进行生物信息学分析，该部分研究结果提示MBL2 rs1800450G→A可能通过降低血清MBL2水平、影响炎性细胞因子释放及降低蛋白质结构稳定性影响脓毒症的发生发展。本项目从遗传背景上评估病人并发脓毒症的风险性和预后，为脓毒症的早期诊断以及制定个体化治疗方案提供理论依据和有效靶点，以达到降低临床严重创伤患者脓毒症发生率和死亡率的目的。