NLRC4/NLRP6炎症小体对干眼眼表组织正负双向性免疫炎症调节机制的研究

Dry eye disease(DED) is a chronic, prevalent ocular surface inflammatory disorder, which cause patients uncomfortable and vision disturbance. The immune and inflammatory injury mechanism during DED is studied on hot worldwide. The latest immunological finding showed that inflammasomes play a crucial role in immune inflammatory disease. We recently finds that the positive regulatory inflammasomes of NLRC4, ASC and its downstream molecular pathway activity highly expressed in DED, whereas the negative regulatory inflammasome NLRP6 activity decreased. This results suggests the inflammasomes mentioned above closely related to DED. Our study will focused on "the effects of these two regulatory inflammasomes NLRC4 and NLRP6 pathway activity on the occurrence and development of DED". Combined with data acquired from the clinical DED patients, the model of corneal and conjunctival epithelial culture cells, and DED mice model, the mechanism of the NLRC4 and NLRP6 inflammasomes involved in DED will be systematically stated, which will provide a new targets and therapeutic strategy for DED.

干眼（Dry eye disease, DED）是慢性的、发病广泛的眼表炎症性紊乱性疾病，导致患者不适和视力障碍，是最常见的眼表疾病，其免疫性炎症损伤机制是目前国内外研究热点之一。最新的免疫学研究发现炎症小体在免疫性炎症损伤疾病中发挥了重要的作用。本组近期发现，DED的发病过程中正向免疫炎症调节炎症小体NLRC4、ASC成分以及下游通路分子活性表达水平增高，而负向免疫炎症调节炎症小体NLRP6活性降低，提示以上两种不同免疫调控方向的炎症小体在DED的发病过程中发挥了关键作用。因此本研究将以“NLRC4、NLRP6两种炎症小体通路活性改变对DED疾病发生和发展的影响”为核心，结合临床DED患者的检测数据，应用培养的眼表角、结膜上皮细胞和DED动物模型，从免疫学和分子生物学角度，系统阐述NLRC4、NLRP6炎症小体在DED发生、发展中的作用机制，从而为干眼的靶向性生物治疗提供新思路。

干眼（Dry Eye Disease, DED）是慢性的、进展性的、发病广泛的眼表炎症性紊乱性疾病，多因素造成的泪液和眼表功能紊乱，从而导致了患者眼部不适症状和视力的障碍，潜行性地破坏眼表功能，是最常见的眼表疾病。DED的发病机制不单纯是由于泪液产生不足或蒸发过度，其发病过程包括了复杂的眼表炎症免疫反应。因此，深入了解干眼的发生机制，开发新型治疗方法是当务之急。固有免疫系统是角膜组织对抗外界压力刺激的第一道防线，其通过一系列模式识别受体识别入侵微生物。本项目从原代角膜上皮细胞体外实验和干眼动物模型体内两部分对NLRP3/NLRC4/NLRP6参与干眼的固有免疫机制进行了系统研究，证明了炎症小体及其相关通路参与了干眼发生和发展的固有免疫反应，NLRP3/NLRC4/NLRP6炎症小体在干眼炎症调节的过程中发挥了非常重要的作用。人角膜原代培养人角膜上皮细胞和小鼠干眼角膜上皮中NLRP3/ASC/NLRC4基因和蛋白表达均升高，其调节了caspase-1前体的活化，活性caspase-1通过剪切的方式活化pro-IL-1β和pro-IL-18前体， 从而使大量成熟的IL-1β，IL-18得以释放，使得这些分子表达均有所增高，然而负性调节炎症反应的NLRP6表达反而降低。这些炎性细胞因子在固有免疫防御的起始、加强等方面有重要作用。进一步研究我们发现caspase-8对调控NLRP3/NLRC4/NLRP6炎症小体在干眼发病过程中的活化发挥至关重要的作用，是角膜上皮固有免疫反参与干眼发病的重要组成部分。进一步，我们通过外源性调节caspase-8/NLRP3/NLRC4/NLRP6的活性，改变了炎症小体相关分子的表达，从而抑制了干眼角膜组织的炎症反应。综合本课题各部分实验结果，可以证实caspase-8/NLRP3/NLRC4/NLRP6/caspase-1参与干眼发病机理，为干眼的治疗提供新思路。