转录因子HIC1通过lncRNA-numb调控葡萄膜黑色素瘤的发生发展

Uveal melanoma is the most common primary intraocular malignancy in adults. Most of patients with uveal melanoma develop metastatic disease with poor prognosis, however, the pathogenesis is still unclear. Previous studies indicate that expression of HIC1 is downregulated in uveal melanoma cells and tissues, and restoring HIC1 expression significantly inhibit cell proliferation and invasion. Further studies have shown that after restoring HIC1, expression of lncRNA-numb was significantly increased. Thus, we speculate that lncRNA-numb is an important downstream target of HIC1 during the progression of uveal melanoma. To test this hypothesis, we will verify whether the tumor suppressor role of HIC1 was disappeared, after lncRNA-numb knockdown by shRNA, and investigate whether the cell proliferation and invasion ability was reduced after lncRNA-numb overexpression in uveal melanoma cells using a lentivirus vector. To further explore the molecular mechanism of HIC1 in lncRNA transcriptional activation, we will evaluate the relationship between HIC1 and lncRNA promoter by chromatin immunoprecipitation(ChIP) and chromatin conformation capture(3C). In this study, we will elaborate exactly how HIC1-lncRNA regulatory pathway influence the progression of uveal melanoma, and aiming to provide a new idea for uveal melanoma diagnosis and treatment.

葡萄膜黑色素瘤（Uveal Melanoma, UM）是成年人中最多见的恶性眼内肿瘤，易发肝转移，致死率高，发病机制不明。前期研究表明HIC1在UM细胞和组织中表达异常下调，在肿瘤细胞中导入外源HIC1能显著抑制细胞的增殖和侵袭转移能力。进一步研究显示，恢复HIC1后，lncRNA-numb的表达明显上调。由此，我们推测lncRNA-numb可能是HIC1调控UM发生发展过程中的一个重要下游分子。为验证这一假说，本研究将通过shRNA干扰lncRNA-numb表达，以及慢病毒系统表达lncRNA-numb等实验，验证在改变lncRNA-numb表达后，HIC1的抑癌作用是否变化。并通过染色质免疫共沉淀、染色质构象捕获等方法研究HIC1在lncRNA转录激活中的调控机制，阐述HIC1-lncRNA调控通路是如何影响UM疾病的发生和发展。希望以此能为UM的临床诊断和治疗提供新的思路。

葡萄膜黑色素瘤（Uveal Melanoma，UM）是成年人中最多见的一种恶性眼内肿瘤，起源于虹膜、睫状体和脉络膜的黑色素细胞，葡萄膜黑色素瘤发病无明显诱因，目前尚无标准治疗方案。癌高甲基化基因1（HIC1）是一个新的肿瘤抑制基因，位于人类第17号染色体。在人类多种肿瘤组织中，HIC1往往发生基因缺失或启动子区高甲基化修饰而导致表达沉默。近年来越来越多的证据表明，在肿瘤中恢复HIC1的表达能够明显改善病人的愈后。在本研究中我们发现：HIC1在UM细胞和组织中表达下调，但HIC1是否与UM发生发展相关，尚未见任何报道。体外实验结果显示：恢复HIC1表达能够显著抑制癌细胞的增殖和侵袭转移能力。HIC1作为一个转录抑制因子的功能已得到广泛认可，同时被认为不具有转录激活体形式。但我们的研究内容却发现，HIC1具有转录激活功能，在UM细胞中恢复HIC1能够激活lncRNA-numb的表达，相反敲除HIC1则下调lncRNA-numb的表达。并且，在乳腺癌中我们也发现了同样的现象。这提示我们HIC1可能存在一种新的调控模式，对于转录激活机制目前未见报道。我们将进一步深入研究HIC1对lncRNA的转录激活机制，并以此为基础来阐述HIC1-lncRNA调控轴是如何影响UM的疾病发展过程，希望以此能为葡萄膜黑色素瘤的临床诊断和治疗提供新的思路。