乳牙牙髓干细胞 α7 nAChR 调控炎性因子 IL-1β 在乳牙生理性根吸收发生发展中的作用及机制研究

Deciduous tooth deciduous is a normal physiological phenomenon, which is an important prerequisite for the establishment of permanent dentition, but its specific mechanism is still unknown. Our research group comfirmed that alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor subtypes (α7 nAChR) was associated with physiological root resorption of primary teeth. DDPSCs from all stages of physiological root resorption had the expression of α7 nAChR, and it was highly expressed at the active stage of root resorption. Besides, at this stage , α7 nAChR could be activated by slurp-1 and upregulated NF-κB and IL-1β. This program would investigate the role of the up regulation effect of α7 nAChR toward the expression of IL-1β of deciduous dental pulp stem cells in the procedure of root absorption for primary teeth and their mechanism.To provide experimental basis for the study of physiological root resorption of primary teeth and teeth replacement mechanism, but also for clinical prevention and treatment of deciduous tooth retention and congenital permanent tooth loss.

乳牙脱落是人牙齿发育过程中正常生理现象,是保证恒牙列顺利建立的重要前提条件,但其具体机制尚不明了。课题组首次证实了α7亚型烟碱型乙酰胆碱受体（Alpha7 Nicotinic Acetylcholine Receptors，α7 nAChR）与乳牙生理性根吸收过程相关。前期实验已证实在生理性根吸收各个阶段的DDPSCs 中均有α7 nAChR的表达、且在根吸收活跃期DDPSCs高表达，同时在根吸收活跃期DDPSCs中α7 nAChR能被slurp-1激活，并上调NF-κB和IL-1β。 本课题拟探讨α7 nAChR调控炎性因子IL-1β影响DDPSCs破骨分化调节能力在乳牙生理性根吸收发生发展中的作用及相关机制，为阐明乳牙生理性根吸收过程和乳恒牙替换机制的研究提供实验依据，也为临床上防治乳牙滞留及保留继承恒牙胚缺失的乳牙提供新思路。

乳牙牙根是人体中唯一能生理性吸收、消失的硬组织,这种特有的生理现象是乳恒牙替换以及恒牙顺利建合的重要前提条件。乳牙生理性根吸收不能正常进行则会引起乳牙脱落异常,临床上最常见的表现为乳牙滞留和牙齿固连, 从而影响继承恒牙的发育和萌出,造成恒牙延迟萌出、阻生及错合畸形。因此研究乳牙生理性根吸收发生发展机制具有重要意义。. 在乳恒牙替换过程中, 究竟是什么因素导致了乳牙生理性根吸收的发生, 目前尚无统一、公认的观点。乳牙生理性根吸收虽然是一种生理性现象,但大量研究表明其发生发展与炎性细胞、炎性因子的参与密切相关。并且课题组前期研究证实在生理性根吸收期,乳牙牙髓腔内面也存在吸收，且乳牙牙髓干细胞可能参与调节牙根吸收。那么乳牙牙髓干细胞是否能够调节炎性微环境在生理性根吸收过程中发挥作用尚未阐明。. 本研究首先收集生理性根吸收各期乳牙样本，通过对各组样本进行固定、切片、染色，观察各期牙髓组织情况及根吸收情况。采用免疫荧光检测各期牙髓组织中α7 nAChR及各炎性因子的表达，明确在根吸收中期乳牙牙髓大量炎性细胞渗且α7 nAChR和IL-1β高表达。随后通过分离培养根吸收中期乳牙牙髓干细胞，通过实时定量PCR、Weastern blot、Elisa等方法检测α7 nAChR、IL-1β及自噬相关分子的表达。并通过α7 nAChR siRNA转染，明确α7 nAChR、自噬以及IL-1β之间的相互调控关系。最后对乳牙牙髓干细胞施加机械压力，研究机械压力是否作为启动因素通过乳牙牙髓干细胞调控自噬以及IL-1β。. 本项目可得出以下结论:乳牙牙髓干细胞在机械压力作用下α7 nAChR的表达发生变化，且α7 nAChR通过自噬调控炎性因子表达在乳牙生理性根吸收发生发展中发挥作用。