Toll受体-Myd88 信号通路在吸入麻醉药异氟醚预处理脑保护中的作用及机制研究

研究表明吸入麻醉药异氟醚预处理可产生脑缺血耐受保护效应,但确切机制尚不清楚。有证据显示脑缺血再灌注损伤激活TLR受体通路；抑制TLR受体通路的关键转接分子-MyD88的表达可明显改善心脏缺血再灌注的心肌细胞凋亡。我们预实验的结果显示：TLR4在脑缺血再灌注损伤后表达升高，异氟醚预处理可明显降低TLR的表达。由此我们推测，TLR-MyD88信号通路极有可能参与了异氟醚预处理的脑保护作用。本项目拟以TLR-MyD88 信号通路为切入点，从基因表达、蛋白合成与磷酸化等多个层次，用局灶性脑缺血模型研究异氟醚预处理对脑内TLR-MyD88通路的影响；并在大体及细胞水平研究该通路参与神经元缺血损伤的分子机制，以阐明TLR-MyD88 信号通路及其调控的下游分子在异氟醚预处理诱导脑缺血耐受效应中的作用，为异氟醚预处理和脑缺血保护研究开拓新的领域。

摘要：脑缺血为中风、脑肿瘤等很多疾病的最根本的病理生理基础，如何减轻缺血再灌注性脑损伤已成为近年来神经科学领域的研究热点。作为倍受众多医学研究领域青睐的TLR4-MyD88信号通路，近年来已有大量研究证实其参与缺血再灌注性脑损伤，抑制此通路的活化表达，无疑为脑保护研究的一个重大方向。大量动物实验研究显示异氟醚预处理无论在体内还是体外均具有脑保护效应，但究其机制一直以来都是众说纷纭。本课题将TLR4-MyD88信号通路与异氟醚预处理在缺血再灌注性脑损伤模型中衔接起来，旨在探讨异氟醚预处理是否通过抑制TLR4-MyD88信号通路而诱导脑保护效应。本研究首先通过在体实验观察到异氟醚预处理后，TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达均下调的现象,初步推断异氟醚预处理诱导脑保护的作用可能与TLR4-MyD88信号通路有关。继而通过体外实验利用TLR4抑制剂CLI-095与异氟醚预处理作效应对比，确定了抑制TLR4-MyD88信号通路为异氟醚预处理脑保护作用的部分机制，为异氟醚预处理和脑缺血保护研究提供了新的理论和实验依据。通过本课题研究，课题组成员还发现并完成了部分新的研究成果，如可能作为TLR4上游配体的5-脂氧合酶（5-LOX）也参与了异氟醚预处理的脑保护效应机制；异氟醚预处理能够保护更具有实际临床意义的脑缺血半暗带，其机制也可能与TLR4-MyD88信号通路有关等，但具体如何实现我们将继续做深入研究。