基于TSLP-OX40L通路探讨玉屏风散改善肝癌微环境免疫抑制状态的机理

Abundant evidence and the results of our pre-study，showed that Yupingfengsan played anti-tumor effects by improving microenvironment immunosuppressive in hepatocellular carcinoma(HCC)，but the exactly mechanisms remain unknown.Thymic stromal lymphopoietin(TSLP) is a novel important inflammatory cytokines,which activated DCs and induced high expression of OX40L in DCs,then promoted Th2-type microenvironment of inflammation. It may be a new mechanism of the tumor microenvironment immunosuppressive. Based on the findings that Yupingfengsan could reduce the TSLP content in tumor and cancer adjacent tissue,we hypothesize: Yupingfengsan played anti-tumor effects by improving microenvironment immunosuppressive(Th2 dominant phenotype of chronic inflammation) in HCC via TSLP-OX40L pathway. In order to clarify the key mechanisms of Yupingfengsan improving microenvironment immunosuppressive in HCC, we will observe the correlation between the regulation of Yupingfengsan on target molecule of TSLP-OX40L pathway and the effects of improving HCC microenvironment immunosuppressive,which will provide theoretical and experimental basis for the treatment of HCC of Yupingfengsan and pave the way for the development of new treatment for HCC.

众多证据和课题组前期的研究，表明玉屏风散可改善肝癌微环境免疫抑制状态，但确切机制尚未阐明。胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一新型的重要炎症相关性细胞因子,通过特有方式激活DCs，诱导DCs细胞高表达OX40L进而促进炎症的Th2型优势，这可能是肿瘤微环境免疫抑制的一个新机制。课题组基于玉屏风散可降低肝癌肿瘤和癌旁组织中TSLP含量的发现，进一步提出假设：玉屏风散是通过对TSLP-OX40L通路的调节，改善肝癌微环境免疫抑制状态（Th2优势表型的慢性炎症），而发挥抑制肝癌的效应。通过研究玉屏风散对TSLP-OX40L通路靶分子表达的调节与其效应的相关性，阐明玉屏风散改善肝癌微环境免疫抑制的关键机制，为其防治肝癌提供理论和实验基础，为中医药防治肝癌提供新策略和有效治疗药物研发新靶标。

肝癌患者肿瘤微环境处于Th2优势免疫抑制表型，改善微环境的免疫抑制状态已成为肝癌治疗的重要靶标。胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）是一种新型的、与炎症相关的细胞因子，通过激活DCs，诱导DCs 细胞高表达OX40L进而促进炎症的Th2型优势，参与疾病的发生和发展，可能是肿瘤微环境免疫抑制的一个新机制。玉屏风散是中医扶正固表的名方，课题组前期的研究证实玉屏风散可通过改善荷瘤小鼠的机体免疫，从而抑制肝癌的生长；可降低肝癌肿瘤和癌旁组织中TSLP 的含量，因此提出假设：玉屏风散是通过对TSLP-OX40L 通路的调节，改善肝癌微环境免疫抑制状态，而发挥抑制肝癌的效应。以整体效应与分子机制研究相结合，应用流式和ELISA等技术手段，采用Hepa1-6原位植入肝癌小鼠模型，得到以下结果：1）TSLP和OX40L在肝癌小鼠中表达增加，肿瘤微环境处于Th2型免疫抑制状态，与肿瘤的生长成正相关；2）玉屏风散具有抗肝癌的效应，可提高肝癌小鼠肿瘤和癌旁组织中Th1/Th2比值，以及CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和NK细胞的比例，降低Treg细胞的比例，改善肿瘤微环境的Th2型免疫抑制状态；3）玉屏风散可降低TSLP-OX40L通路中的关键靶分子TSLP、TSLPR和OX40L在肿瘤和癌旁组织中的水平；可通过调节STAT1，5，6磷酸化水平改善DCs细胞成熟的状态和CD4+T细胞的分化趋势，从而达到肿瘤微环境Th2型免疫抑制状态的改善。研究结果证实了玉屏风散可以改善肝癌小鼠肿瘤微环境的免疫抑制状态，其关键机制与TSLP-OX40L通路相关。为玉屏风散防治肝癌提供实验和理论基础；并为发展靶向TSLP通路从而改善肝癌微环境免疫抑制，实现延长肝癌患者生存期的新策略和研发理想的治疗药物提供新的靶标。