乳酸球菌穿梭载体的构建及乳链菌肽基因的克隆和表达

本工作以广泛宿主范围质粒pMG36e为基础，用β-内酰胺酶基因为报告基因，从乳酸球中筛选启动子一信号肽功能片段，对筛选到的具有较强表达分泌性功能与片段的DNA序列测定，表明含有典型的启动子，SD序列及较为典型的信号肽序列，用此DNA片段已构建乳酸乳球菌分泌表达载体，同时用EMBL3BamHI双臂系统建立了乳链菌肽产生菌乳酸乳球菌7962的基因文库，并以nisA和nisG的PCR扩增片段为探针，从文库中筛选获得3个都呈阳性反应的重组噬菌斑，对阳性噬斑的进一步分析表明是含有乳链菌肽生物合成全部基因的完整的操纵子，正在将其克降到上述分泌表达载体上进行分泌，表达的研究。