Del血型与抗－D同种免疫反应相关性及其机制的研究

Del血型是汉族人群中最常见的弱D，约占汉族Rh阴性人群的1/3。我国目前尚未规定Del血型为献血和输血的常规检测项目，通常将其视为Rh阴性。然而，Del型红细胞是否引起同种免疫性溶血反应？Del型患者能否接受RhD阳性输血？目前存在很大争议。已有一些有关Rh阴性患者输注Del型红细胞产生抗-D同种免疫反应的报道。但因缺少系统性研究，目前关于Del型红细胞诱发抗-D同种免疫反应的概率及机制知之甚少。抗原的质和量决定着免疫应答的发生。不同Del型供血者红细胞诱发抗-D同种免疫反应和Del型受血者对RhD阳性红细胞耐受的差异可能与其RHD基因结构、红细胞膜表面RhD抗原的质和量有关。本项目拟采用RHD基因序列分析、红细胞膜表面RhD抗原密度测定和表位表达谱分析等手段，通过大样本的临床资料来分析Del血型与抗-D同种免疫反应的相关性及机制，为制订Del血型输血策略提供研究依据。

Del血型是汉族人群中最常见的弱D，约占汉族Rh阴性人群的1/3。我国目前尚未规定Del血型为献血和输血的常规检测项目，通常将其视为Rh阴性。然而，Del型红细胞是否引起同种免疫性溶血反应？Del型患者能否接受RhD阳性输血？目前存在很大争议。本项目采用RHD基因序列分析、红细胞膜表面RhD抗原密度测定和表位表达谱分析等手段，通过对临床资料的分析来探讨Del血型与抗-D同种免疫反应的相关性及机制。主要研究内容和研究结果如下：1.对40例Del型个体进行编码区RHD基因全长序列分析，发现13种新的等位基因（GenBank注册3种），其中10种由外显子缺失伴碱基突变或单独的外显子缺失引起， 另3种由单纯的碱基突变引起。结果提示：1.1 安徽地区汉族人群Del型存在高度的基因多态性；1.2. Del个体红细胞膜表面可能存在RhD抗原表位的缺失，即汉族人群中可能存在部分Del表型。2.对155例Del个体进行了红细胞膜表面D抗原表位分析和密度测定，其中152例检测到D抗原1～9表位（表位完整），3例2号表位缺失。该项结果进一步证实了Del个体红细胞膜表面存在RhD抗原表位缺失和汉族人群中存在部分Del表型。D抗原密度测定结果显示， RhD阴性、Del及RhD阳性红细胞表面D抗原平均荧光强度分别为11.89±1.95，20.62±3.43，217.30±10.58；表明Del红细胞表面D抗原含量极低。3.对16例（其中13例随访成功）在本院接受Del红细胞输血的RhD真阴性患者进行了追踪和随访。分别在输血前和输血后1周～6个月进行血清抗-D水平测定，抗-D效价均为0。提示RhD真阴性患者接受Del型红细胞输血是安全的，可能的原因是Del红细胞膜表面D抗原密度太低不足以诱发有效的免疫应答。但证实这一推断还需进一步做大标本量的临床研究。4. 对到本院就诊的52例单胎妊娠的Del型孕妇进行血清IgG抗-D效价动态测定，其中7例妊娠有RhD阳性胎儿的孕妇血清中检测出抗-D。成功随访的3名抗-D阳性孕妇均存在红细胞膜表面RhD抗原2号表位缺失，1例发生HDN。该项结果提示：4.1. Del孕妇红细胞膜表面RhD抗原表位缺失是诱发抗-D产生的主要原因;4.2. Del个体接受RhD阳性红细胞输血存在风险。