环状RNA0008766通过miR-21-3p介导心肌肥大分子机制的研究

Myocardial hypertrophy is a common pathological change in several cardiovascular diseases, and so far there is no effective therapies. We found that miR-21-3p was a key microRNA which was increased in myocardial hypertrophy while inhibition of miR-21-3p could attenuate that. Circular RNAs (circRNAs) act as competing endogenous sponge RNAs of miRNAs by complmentary base paring. However, if circRNA is involved in the process of myocardial hypertrophy is still unclear. In this project, based on bioinformatic findings, we will use co-immunoprecipitation and luciferase assay to identify sponge circRNAs of miR-21-3p. Furthermore, we will explore the roles of circ_0008766 in myocardial hypertrophy by overexpressing and inhibitting it both in vitro and in vivo. In conclusion, our project will prove that circ_0008766 contributes to myocardial hypertrophy and may demonstrate a potential strategy for the treatment of cardiovascular diseases based on circ_0008766-miR-21-3p signaling pathway.

心肌肥大是多种心脏疾病共同的病理改变，目前缺乏有效的干预方法。我们发现，miR-21-3p是介导心肌肥大发生的关键的微小RNA，并且抑制miR-21-3p可防治心肌肥大。环状RNA可作为内源性microRNA的海绵体，通过与miRNA结合，参与其靶基因的调控。但环状RNA是否参与心肌肥大的进程尚不明确。本项目拟从生物信息学出发，发掘出可作为miR-21-3p的内源性的分子海绵的环状RNA0008766，然后通过荧光素酶实验、免疫共沉淀的方法验证miR-21-3p与环状RNA0008766的相互作用，最后通过过表达和抑制实验，在细胞水平和动物水平，明确环状RNA0008766与病理性心脏肥大的关系，并研究调控机制。本课题从miR-21-3p介导的心肌肥大出发，寻找出介导心肌肥大的环状RNA0008766，将有望发掘出治疗和防治心肌肥大的新靶点。

心肌肥大是病理性心肌重塑进展为心力衰竭共同的病理改变，其发病率和死亡率极高。目前在国际范围内都缺乏行之有效的干预方法。环状RNA可作为内源性微小RNA的海绵体，通过与微小RNA结合，对其靶基因的调控进而参与许多心血管疾病的发生。为了阐明心肌肥大中差异环状RNA的表达情况，我们将压力诱导心肌肥大小鼠模型进行环状RNA和微小RNA芯片检测。最终发现35个差异表达的环状RNA和32个微小RNAs，其中既往报道的miR-21是介导心肌肥大发生的关键的微小RNA,其在TAC诱导心肌肥大模型中表达上调。与此同时，我们发现竞争性抑制miR-21的海绵体，环状RNA0008766，在TAC诱导心肌肥大模型中表达下调。因此我们推测环状RNA0008766参与心肌肥大的进程。为了进一步研究其作用，我们在在细胞水平和动物水平中过表达环状RNA0008766，结果表明环状RNA0008766过表达能减轻心肌的肥大和心肌标志物ANP、BNP的升高，明确环状RNA0008766抗心脏肥大的作用。然后通过荧光素酶实验验证miR-21与环状RNA0008766的相互作用。最后通过过表达和抑制实验，在细胞水平和动物水平，明确环状RNA0008766是通过抑制miR21介导的心肌肥大发挥作用。.综上所述，我们首次证明circ_0008766与病理性心肌肥大的关系，首次明确circ_0008766与miR-21-3p的相互调节及其参与心肌肥大的调控网络机制。有望将环状RNA circ_0008766发掘为一个防治心肌肥大的药物靶点。