对虾自然杀伤细胞增强因子及其在WSSV感染中的作用

自然杀伤细胞增强因子（NKEF）是高等生物先天性免疫系统的重要组成因子，能显著增强NK细胞的活性，在机体抵御病毒感染中起着重要作用。本研究将采用分子生物学和细胞生物学的方法研究中国对虾NKEF的抗病毒活性及其免疫学功能。主要是通过对中国对虾NKEF基因不同变体的克隆和表达，分析该基因不同变体的序列特征及其在对虾免疫系统中的调控；同时通过研究重组对虾NKEF蛋白在体外的抗WSSV活性，以及NKEF基因转录被干扰后WSSV感染对虾进程的变化，探究NKEF在对虾抵御病毒感染中的作用。上述研究，将有助于阐明NKEF在对虾先天性免疫系统中的地位和作用，为对虾病毒病的防治提供新的思路和理论依据，同时也为揭示甲壳动物免疫系统的进化规律提供证据。

分析了NKEF基因两种变体的序列特征、组织分布以及对虾感染WSSV后各变体在mRNA水平的调控趋势，初步探明了对虾NKEF基因不同变体的分布、转录和表达差异；通过对NKEF-B基因的原核重组表达、纯化和抗体杂交试验，证实WSSV感染能够诱导NKEF-B蛋白表达量升高，这提示NKEF-B可能参与中国对虾应对WSSV感染的免疫防御反应；通过NKEF-B基因的RNAi实验，初步证明对虾注射NKEF-B双链RNA后WSSV的感染进程会加快；同时克隆获得了中国明对虾Prx基因的两种变体Prx4、Prx5的cDNA序列，分析了其组织分布以及对虾感染WSSV后两种Prx变体在mRNA水平的调控趋势，并证明体外重组表达的Prx4、Prx5具有-HS依赖的过氧化物酶活性；课题已发表SCI收录文章2篇；这些研究结果的取得丰富了对中国对虾先天性免疫系统的认识。